Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску
Иллюстрация слияния липидных пузырьков, показывающая два возможных исхода: гемифузия и полное слияние. При гемифузии смешиваются только наружные двухслойные листочки. При полном слиянии как листочки, так и внутреннее содержимое смешиваются.

В мембранной биологии , слитое это процесс , с помощью которого два первоначально различных липидных бислой объединить их гидрофобные ядра, в результате чего один взаимосвязанной структуры. Если это слияние полностью проходит через обе створки обоих бислоев, образуется водный мостик, и внутреннее содержимое двух структур может смешиваться. Альтернативно, если только одна листочка из каждого бислоя участвует в процессе слияния, говорят, что бислои гемифузированы. При гемифузии липидные составляющие наружной створки двух бислоев могут смешиваться, но внутренние створки остаются отдельными. Водное содержимое, заключенное в каждом бислое, также остается разделенным.

Слияние участвует во многих клеточных процессах, особенно у эукариот, поскольку эукариотическая клетка широко разделена липидными двухслойными мембранами. Экзоцитоз , оплодотворение из яйца с помощью спермы и транспортировки отходов в лизосомы некоторые из многих эукариотических процессов, опирающихся на какой - либо форме слияния. Слияние также является важным механизмом транспорта липидов от места их синтеза к мембране, где они необходимы. Даже проникновение патогенов может регулироваться слиянием, поскольку многие вирусы с двухслойной оболочкой имеют специальные слитые белки для проникновения в клетку-хозяина.

Липидный механизм [ править ]

Дополнительная информация: Межслойные силы при слиянии мембран

Процесс слияния состоит из четырех основных этапов, хотя каждый из них на самом деле представляет собой сложную последовательность событий. [1]Во-первых, вовлеченные мембраны должны агрегироваться, приближаясь друг к другу с точностью до нескольких нанометров. Во-вторых, два бислоя должны войти в очень тесный контакт (в пределах нескольких ангстрем). Чтобы достичь этого тесного контакта, две поверхности должны стать, по крайней мере, частично обезвоженными, поскольку связанная поверхностная вода, обычно присутствующая на этом расстоянии, вызывает сильное отталкивание двух слоев. В-третьих, дестабилизация должна развиваться в одной точке между двумя бислоями, вызывая сильно локализованную перестройку двух бислоев. Наконец, по мере роста этого точечного дефекта компоненты двух бислоев смешиваются и диффундируют от места контакта. В зависимости от того, происходит ли гемифузия или полное слияние, внутреннее содержимое мембран также может смешиваться в этот момент.

Схематическое изображение процесса слияния через образование стебля.

Точные механизмы, стоящие за этой сложной последовательностью событий, все еще остаются предметом споров. Чтобы упростить систему и позволить более точное исследование, многие эксперименты были выполнены in vitro с синтетическими липидными везикулами. Эти исследования показали, что двухвалентные катионы играют решающую роль в процессе слияния, связываясь с отрицательно заряженными липидами, такими как фосфатидилсерин , фосфатидилглицерин и кардиолипин . [2] Одна из ролей этих ионов в процессе синтеза - экранировать отрицательный заряд на поверхности бислоя, уменьшая электростатическое отталкивание.и позволяя мембранам приближаться друг к другу. Однако это явно не единственная роль, поскольку существует широко документированная разница в способности Mg 2+ по сравнению с Ca 2+ вызывать слияние. Хотя Mg 2+ вызывает обширную агрегацию, он не вызывает слияния, в то время как Ca 2+ вызывает и то, и другое. [3] Было высказано предположение, что это несоответствие связано с разницей в степени обезвоживания. Согласно этой теории, ионы кальция сильнее связываются с заряженными липидами, но менее сильно с водой. Возникающее в результате вытеснение кальция водой дестабилизирует поверхность раздела липид-вода и способствует тесному межслойному контакту. [4]Недавно предложенная альтернативная гипотеза состоит в том, что связывание кальция вызывает дестабилизирующее боковое напряжение . [5] Каким бы ни был механизм индуцированного кальцием слияния, начальное взаимодействие явно электростатическое, поскольку цвиттерионные липиды не восприимчивы к этому эффекту. [6] [7]

В процессе слияния головная группа липидов не только участвует в плотности заряда, но и может влиять на дегидратацию и зарождение дефектов. Эти эффекты не зависят от воздействия ионов. Присутствие незаряженного фосфатидилэтаноламина (ПЭ) головной группы увеличивает слияние при включении в бислой фосфатидилхолина. Некоторые объясняют это явление эффектом обезвоживания, аналогичным влиянию кальция. [8] Головная группа из полиэтилена менее плотно связывает воду, чем поликарбонат, и поэтому может обеспечить более легкое закрытие соединения. Альтернативное объяснение состоит в том, что физическая, а не химическая природа полиэтилена может способствовать слиянию. Согласно гипотезе стебля слияния, сильно изогнутый мост должен образоваться между двумя бислоями, чтобы слияние произошло. [9]Поскольку PE имеет небольшую головную группу и легко образует инвертированные фазы мицелл, он, согласно модели стебля, должен способствовать образованию этих стеблей. [10] Дополнительным доказательством, приведенным в пользу этой теории, является тот факт, что определенные липидные смеси, как было показано, поддерживают слияние, только когда они превышают температуру перехода этих инвертированных фаз. [11] [12] В этом раздел также остается спорным, и даже если существует криволинейная структура присутствует в процессе сварки, есть дебаты в литературе более , является ли она кубической, гексагональной или более экзотической расширенной фазой. [13]

Белки слияния [ править ]

Основная статья: мембранный гибридный белок
Схема действия белков SNARE, стыкующих везикулу для экзоцитоза. Дополнительные версии белка на везикуле и целевой мембране связываются и обвиваются вокруг друг друга, сближая два бислоя в процессе. [14]

Ситуация еще более усложняется при рассмотрении слияния in vivo, поскольку биологическое слияние почти всегда регулируется действием связанных с мембраной белков . Первыми из этих белков, которые должны были быть изучены, были слитые белки вируса, которые позволяют вирусу с оболочкой вставлять свой генетический материал в клетку-хозяин (вирусы с оболочкой - это вирусы, окруженные липидным бислоем; некоторые другие имеют только белковое покрытие). В целом, существует два класса вирусных слитых белков: кислые и независимые от pH. [1] pH- независимые гибридные белки могут функционировать в нейтральных условиях и сливаться с плазматической мембраной , позволяя вирусам проникать в клетку. Вирусы, использующие эту схему, включали ВИЧ, корь и герпес . Кислотные слитые белки, такие как те, что обнаруживаются при гриппе , активируются только при низком pH кислых эндосом и должны сначала подвергнуться эндоцитозу, чтобы проникнуть в клетку.

Эукариотические клетки используют совершенно разные классы гибридных белков, наиболее изученными из которых являются SNARE . Белки SNARE используются для управления всем везикулярным внутриклеточным перемещением. Несмотря на годы исследований, многое еще неизвестно о функции этого класса белков. Фактически, до сих пор ведутся активные дебаты относительно того, связаны ли SNAREs с ранней стыковкой или участвуют позже в процессе слияния, облегчая гемифузию. [15] Даже после того, как будет освещена роль SNARE или других специфических белков, единое понимание гибридных белков маловероятно, поскольку существует огромное разнообразие структур и функций внутри этих классов, и очень мало тем сохраняется. [16]

Fusion в лабораторной практике [ править ]

В исследованиях молекулярной и клеточной биологии часто бывает желательно искусственно вызвать слияние. Хотя это может быть достигнуто с добавлением кальция, как обсуждалось ранее, эта процедура часто невозможна, потому что кальций регулирует многие другие биохимические процессы, и его добавление может вызвать серьезные затруднения. Кроме того, как уже упоминалось, кальций вызывает массивную агрегацию, а также слияние. Добавление полиэтиленгликоля (ПЭГ) вызывает слияние без значительной агрегации или биохимического разрушения. В настоящее время эта процедура широко используется, например, путем слияния В-клеток с клетками миеломы . [17] Полученная « гибридома » из этой комбинации экспрессирует желаемое антитело.как определено вовлеченными В-клетками, но увековечивается из-за миеломного компонента. Механизм слияния PEG окончательно не установлен, но некоторые исследователи полагают, что PEG, связывая большое количество молекул воды, эффективно снижает химическую активность воды и, таким образом, обезвоживает головные группы липидов. [18] Слияние также может быть вызвано искусственно посредством электропорации в процессе, известном как электрослияние. Считается, что это явление является результатом энергетически активных краев, образованных во время электропорации, которые могут действовать как локальные дефектные точки для зарождения стеблей между двумя бислоями. [19]

В качестве альтернативы можно использовать модельные системы, вдохновленные SNARE, для индукции слияния липидных пузырьков с мембранами. В этих системах заякоренная мембрана комплементарная ДНК, [20] [21] ПНК, [22] пептиды, [23] или другие молекулы [24] «застегиваются» вместе и сближают мембраны. Такие системы могут найти практическое применение в будущем, например, для доставки лекарств. [25] Вероятно, наиболее изученная система [26] состоит из пептидов, образующих спиральную спираль, с дополнительным зарядом (один обычно несет избыток положительно заряженных лизинов и поэтому называется пептидом K, а другой - отрицательно заряженной глутаминовой кислотой, называемой пептидом E). [27]Интересно, что было обнаружено, что не только образование спиральной спирали между двумя пептидами необходимо для слияния мембран, но также что пептид K взаимодействует с поверхностью мембраны и вызывает локальные дефекты. [28]

Анализы для измерения слияния мембран [ править ]

Есть два уровня слияния: смешивание мембранных липидов и смешивание содержимого. Анализы слияния мембран сообщают либо о смешивании мембранных липидов, либо о смешивании водного содержимого слитых объектов.

Анализы для измерения смешивания липидов [ править ]

Анализы, оценивающие смешение липидов, используют эффекты, зависящие от концентрации, такие как безызлучательный перенос энергии, тушение флуоресценции и образование эксимера пирена.

(1.) Иллюстрация анализа смешения липидов на основе резонансного переноса энергии Фёрстера.
(3.) Иллюстрация анализа смешения липидов на основе самотушения флуоресценции.
  1. Перенос энергии NBD-родамином: [29] В этом методе мембрана, меченная как NBD (донор), так и родамином (акцептор), сочетается с немеченой мембраной. Когда NBD и родамин находятся на определенном расстоянии, происходит резонансная передача энергии Фёрстера (FRET). После слияния резонансная передача энергии (FRET) уменьшается при увеличении среднего расстояния между зондами, в то время как флуоресценция NBD увеличивается.
  2. Образование эксимерного пирена: длины волн испускания мономера пирена и эксимера различаются. Длина волны излучения мономера составляет около 400 нм, а эксимера - около 470 нм. В этом методе мембрана, помеченная пиреном, сочетается с немеченой мембраной. Пирен самоассоцируется в мембране, а затем возбужденный пирен возбуждает другой пирен. До синтеза большая часть излучения - это эксимерное излучение. После слияния расстояние между зондами увеличивается, а коэффициент эксимерной эмиссии уменьшается. [ необходима цитата ]
  3. Самотушение октадецилродамина B: [30] Этот анализ основан на самотушении октадецилродамина B. Самотушение октадецилродамина B происходит, когда зонд включается в липиды мембран в концентрациях 1–10 мольных процентов [31], потому что Димеры родамина тушат флуоресценцию. В этом методе мембрана, помеченная родамином, сочетается с немеченой мембраной. Слияние с немечеными мембранами приводит к разбавлению зонда, которое сопровождается увеличением флуоресценции. [32] [33] Основная проблема этого теста - спонтанный перенос.

Анализы для измерения смешивания содержания [ править ]

Смешивание водного содержимого с пузырьками в результате лизиса, слияния или физиологической проницаемости может быть обнаружено флуорометрически с использованием растворимых индикаторов с низкой молекулярной массой.

(1.) Иллюстрация анализа смешения содержимого на основе пары гашения флуоресценции ANTS / DPX.
(2.) Иллюстрация анализа смешения содержимого на основе пары усиления флуоресценции Tb 3+ / DPA.
  1. Анализы гашения флуоресценции с помощью ANTS / DPX: [34] [35] ANTS представляет собой полианионный флуорофор, а DPX - гаситель катионов. Анализ основан на их столкновительном тушении. В отдельные популяции везикул загружают ANTS или DPX соответственно. Когда происходит смешивание контента, ANTS и DPX сталкиваются, и флуоресценция ANTS, контролируемая на 530 нм, с возбуждением на 360 нм гаснет. Этот метод выполняется при кислом pH и высокой концентрации.
  2. Анализы усиления флуоресценции с Tb 3+ / DPA: [36] [37] Этот метод основан на том факте, что хелат Tb 3+ / DPA в 10 000 раз более флуоресцентный, чем один Tb 3+ . В анализе Tb 3+ / DPA отдельные популяции везикул загружают TbCl 3 или DPA. Образование хелата Tb 3+ / DPA можно использовать для индикации слияния везикул. Этот метод подходит для мембран, не содержащих белка. [ необходима цитата ]
  3. Анализ одиночной молекулы ДНК. [38] Шпилька ДНК, состоящая из стержня из 5 пар оснований и политимидиновой петли, меченная донором (Cy3) и акцептором (Cy5) на концах стержня, была инкапсулирована в везикулу v-SNARE. Мы отдельно инкапсулировали несколько немеченых цепей полиаденозиновой ДНК в везикуле t-SNARE. Если две везикулы, оба диаметром ~ 100 нм, состыковываются и между ними образуется достаточно большая пора слияния, две молекулы ДНК должны гибридизоваться, открывая область стержня шпильки и переключая эффективность резонансной передачи энергии Фёрстера (FRET) ( E) между Cy3 и Cy5 от высокого до низкого значения.

См. Также [ править ]

  • Межслойные силы в слиянии мембран
  • Механизм слияния
  • Слияние клеток

Ссылки [ править ]

  1. ^ а б Йигл, PL (1993). Мембраны клеток (2-е изд.). Сан-Диего: Academic Press.[ требуется страница ]
  2. ^ Papahadjopoulos, Димитрий; Нир, Шломо; Düzgünes, Nejat (1990). «Молекулярные механизмы индуцированного кальцием слияния мембран». Журнал биоэнергетики и биомембран . 22 (2): 157–79. DOI : 10.1007 / BF00762944 . PMID 2139437 . S2CID 1465571 .  
  3. ^ Левентис, Рания; Гань, Жаннин; Фуллер, Нола; Rand, R .; Сильвиус, Дж. (1986). "Двухвалентное катион-индуцированное слияние и боковая сегрегация липидов в пузырьках фосфатидилхолин-фосфатидная кислота". Биохимия . 25 (22): 6978–87. DOI : 10.1021 / bi00370a600 . PMID 3801406 . 
  4. ^ Wilschut, Ян; Duezguenes, Nejat; Папахаджопулос, Деметриос (1981). «Специфичность кальция / магния в слиянии мембран: кинетика агрегации и слияния везикул фосфатидилсерина и роль искривления бислоя». Биохимия . 20 (11): 3126–33. DOI : 10.1021 / bi00514a022 . PMID 7248275 . 
  5. ^ Чантурия, А; Scaria, P; Вудл, MC (2000). «Роль бокового натяжения мембраны в индуцированном кальцием слиянии мембран». Журнал мембранной биологии . 176 (1): 67–75. DOI : 10.1007 / s00232001076 . PMID 10882429 . S2CID 2209769 .  
  6. ^ Паннуццо, Мартина; Джонг, Де; Djurre, H .; Раудино, Антонио; Марринк Сиверт, Дж. (2014). «Моделирование слияния полиэтиленгликоля и кальций-опосредованной мембраны» (PDF) . J. Chem. Phys . 140 (12): 124905. Bibcode : 2014JChPh.140l4905P . DOI : 10.1063 / 1.4869176 . PMID 24697479 .  
  7. ^ Папахаджопулос, Д .; Poste, G .; Schaeffer, BE; Вейл, WJ (1974). «Слияние мембран и молекулярная сегрегация в фосфолипидных везикулах». Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Биомембраны . 352 (1): 10–28. DOI : 10.1016 / 0005-2736 (74) 90175-8 . PMID 4859411 . 
  8. ^ Düzgünes, Nejat; Вильшут, Ян; Фрейли, Роберт; Папахаджопулос, Деметриос (1981). «Исследования механизма слияния мембран. Роль состава головной группы в индуцированном кальцием и магнием слиянии смешанных фосфолипидных везикул». Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Биомембраны . 642 (1): 182–95. DOI : 10.1016 / 0005-2736 (81) 90148-6 . PMID 7225377 . 
  9. ^ Маркин, В.С.; Козлов, ММ; Боровягин, ВЛ (1984). «К теории слияния мембран. Стволовой механизм» (PDF) . Общая физиология и биофизика . 3 (5): 361–77. PMID 6510702 .  
  10. ^ Черномордик, Леонид В .; Козлов, Михаил М. (2003). «Взаимодействие белков и липидов при слиянии и делении биологических мембран» . Ежегодный обзор биохимии . 72 : 175–207. DOI : 10.1146 / annurev.biochem.72.121801.161504 . PMID 14527322 . 
  11. ^ Nir, S .; Bentz, J .; Wilschut, J .; Дузгунес, Н. (1983). «Агрегация и слияние фосфолипидных везикул». Прогресс в науке о поверхности . 13 (1): 1–124. Bibcode : 1983PrSS ... 13 .... 1N . DOI : 10.1016 / 0079-6816 (83) 90010-2 .
  12. ^ Элленс, Харма; Бенц, Джо; Szoka, Фрэнсис К. (1986). «Слияние липосом, содержащих фосфатидилэтаноламин, и механизм фазового перехода L.alpha.-HII». Биохимия . 25 (14): 4141–7. DOI : 10.1021 / bi00362a023 . PMID 3741846 . 
  13. ^ Холопайнен, Юха М .; Лехтонен, Юкка Ю.А.; Киннунен, Пааво К.Дж. (1999). «Доказательства расширенной конформации фосфолипидов при слиянии мембран и гемифузии» . Биофизический журнал . 76 (4): 2111–20. Bibcode : 1999BpJ .... 76.2111H . DOI : 10.1016 / S0006-3495 (99) 77367-4 . PMC 1300184 . PMID 10096906 .  
  14. ^ Георгиев, Данко Д .; Глейзбрук, Джеймс Ф. (2007). «Субнейронная обработка информации уединенными волнами и случайными процессами» . В Лышевском, Сергей Эдуард (ред.). Справочник по нано- и молекулярной электронике . Серия нано- и микротехники. CRC Press. С. 17–1–17–41. DOI : 10.1201 / 9781420008142.ch17 (неактивный 2021-01-10). ISBN 978-0-8493-8528-5.CS1 maint: DOI неактивен с января 2021 г. ( ссылка )
  15. ^ Чен, Ю. А .; Шеллер, Ричард Х. (2001). «SNARE-опосредованное слияние мембран». Обзоры природы Молекулярная клеточная биология . 2 (2): 98–106. DOI : 10.1038 / 35052017 . PMID 11252968 . S2CID 205012830 .  
  16. Перейти ↑ White, JM (1990). «Белки слияния вирусных и клеточных мембран». Ежегодный обзор физиологии . 52 : 675–97. DOI : 10.1146 / annurev.ph.52.030190.003331 . PMID 2184772 . 
  17. ^ Köhler, G .; Мильштейн, К. (1975). «Непрерывные культуры слитых клеток, секретирующих антитела с заранее определенной специфичностью». Природа . 256 (5517): 495–7. Bibcode : 1975Natur.256..495K . DOI : 10.1038 / 256495a0 . PMID 1172191 . S2CID 4161444 .  
  18. Перейти ↑ Lentz, Barry R. (1994). «Полимер-индуцированное слияние мембран: потенциальный механизм и связь с событиями слияния клеток». Химия и физика липидов . 73 (1-2): 91-106. DOI : 10.1016 / 0009-3084 (94) 90176-7 . PMID 8001186 . 
  19. ^ Иордания, Калифорния; Neumann, E .; Сауэрс, AE, ред. (1989). Электропорация и электрослияние в клеточной биологии . Springer. ISBN 978-0-306-43043-5.[ требуется страница ]
  20. ^ Löffler, Филипп MG; Рис, Оливер; Рабе, Александр; Охольм, Андерс Х .; Thomsen, Rasmus P .; Кьемс, Йорген; Фогель, Стефан (2017). "ДНК-запрограммированный каскад слияния липосом" . Angewandte Chemie International Edition . 56 (43): 13228–13231. DOI : 10.1002 / anie.201703243 . ISSN 1521-3773 . PMID 28598002 .  
  21. ^ Стенгель, Гудрун; Зан, Рафаэль; Хёк, Фредрик (1 августа 2007 г.). «ДНК-индуцированное программируемое слияние фосфолипидных везикул» . Журнал Американского химического общества . 129 (31): 9584–9585. DOI : 10.1021 / ja073200k . ISSN 0002-7863 . PMID 17629277 .  
  22. ^ Лыгина, Антонина С .; Мейенберг, Карстен; Ян, Рейнхард; Дидериксен, Ульф (2011). «Трансмембранный домен пептид / гибрид пептидной нуклеиновой кислоты как модель белка SNARE в слиянии везикул» . Angewandte Chemie International Edition . 50 (37): 8597–8601. DOI : 10.1002 / anie.201101951 . hdl : 11858 / 00-001M-0000-000F-41FF-2 . ISSN 1521-3773 . PMID 21786370 .  
  23. ^ Литовски, младший; Ходжес, RS (2002-10-04). «Разработка гетеродимерных двухцепочечных α-спиральных спиральных катушек: влияние гидрофобности и α-спиральности на сворачивание белков, стабильность и специфичность» . Журнал биологической химии . 277 (40): 37272–37279. DOI : 10.1074 / jbc.M204257200 . ISSN 0021-9258 . PMID 12138097 . S2CID 84379119 .   
  24. ^ Кумар, Паван; Гуха, Самит; Дидериксен, Ульф (2015). «Слияние мембран, опосредованное аналогом белка SNARE» . Журнал пептидной науки . 21 (8): 621–629. DOI : 10.1002 / psc.2773 . ISSN 1099-1387 . PMID 25858776 . S2CID 23718905 .   
  25. ^ Ян, Цзянь; Бахреман, Азаде; Дауди, Герт; Буссманн, Йерун; Olsthoorn, René CL; Крос, Александр (28.09.2016). «Доставка лекарств посредством слияния клеточных мембран с использованием липосом, модифицированных липопептидами» . АСУ Центральная Наука . 2 (9): 621–630. DOI : 10.1021 / acscentsci.6b00172 . ISSN 2374-7943 . PMC 5043431 . PMID 27725960 .   
  26. ^ Робсон Марсден, Хана; Эльберс, Нина А .; Боманс, Пол HH; Соммердейк, Нико А.Д.М.; Крос, Александр (2009). «Уменьшенная модель SNARE для слияния мембран» . Angewandte Chemie International Edition . 48 (13): 2330–2333. DOI : 10.1002 / anie.200804493 . ISSN 1521-3773 . PMID 19222065 .  
  27. ^ Линдхаут, Даррин А .; Литовски, Дженнифер Р .; Мерсье, Паскаль; Ходжес, Роберт С .; Сайкс, Брайан Д. (2004). "Структура раствора ЯМР высокостабильной гетеродимерной спирали de novo" . Биополимеры . 75 (5): 367–375. DOI : 10.1002 / bip.20150 . ISSN 1097-0282 . PMID 15457434 . S2CID 28856028 .   
  28. ^ Rabe, Мартин; Айзенбрей, Кристофер; Плугацкова, Кристина; Де Вер, Винсент; Boyle, Aimee L .; Брюггеман, Диджай Ф .; Кирш, Соня А .; Böckmann, Rainer A .; Крос, Александр; Раап, Ян; Бехингер, Буркхард (15.11.2016). "Спиральный пептид, формирующий липидные бислои после слияния" . Биофизический журнал . 111 (10): 2162–2175. Bibcode : 2016BpJ ... 111.2162R . DOI : 10.1016 / j.bpj.2016.10.010 . ISSN 0006-3495 . PMC 5113151 . PMID 27851940 .   
  29. ^ Struck, Дуглас К .; Хоэкстра, Дик; Пагано, Ричард Э. (1981). «Использование резонансной передачи энергии для контроля слияния мембран». Биохимия . 20 (14): 4093–9. DOI : 10.1021 / bi00517a023 . PMID 7284312 . 
  30. ^ Hoekstra, Дик; Де Бур, Крошечный; Клаппе, Карин; Вильшут, Ян (1984). «Флуоресцентный метод измерения кинетики слияния биологических мембран». Биохимия . 23 (24): 5675–81. DOI : 10.1021 / bi00319a002 . PMID 6098295 . 
  31. ^ Макдональд, Рубин I (1990). «Характеристики самотушения флуоресценции липид-конъюгированного родамина в мембранах» . Журнал биологической химии . 265 (23): 13533–9. DOI : 10.1016 / S0021-9258 (18) 77380-8 . PMID 2380172 . 
  32. ^ Рубин, RJ; Чен, Ю. Д. (1990). «Диффузия и перераспределение липидоподобных молекул между мембранами в системах слияния вирус-клетка и клетка-клетка» . Биофизический журнал . 58 (5): 1157–67. Bibcode : 1990BpJ .... 58.1157R . DOI : 10.1016 / S0006-3495 (90) 82457-7 . PMC 1281061 . PMID 2291940 .  
  33. ^ Чен, Ю.Д .; Рубин, Р.Дж.; Сабо, А. (1993). «Кинетика ослабления флуоресценции одноклеточных слитых комплексов» . Биофизический журнал . 65 (1): 325–33. Bibcode : 1993BpJ .... 65..325C . DOI : 10.1016 / S0006-3495 (93) 81076-2 . PMC 1225727 . PMID 8369440 .  
  34. ^ Смолярский, Моше; Тейтельбаум, Двора; Села, Майкл; Гитлер, Карлос (1977). «Простой флуоресцентный метод определения опосредованного комплементом иммунного лизиса липосом». Журнал иммунологических методов . 15 (3): 255–65. DOI : 10.1016 / 0022-1759 (77) 90063-1 . PMID 323363 . 
  35. ^ Элленс, H; Бенц, Дж; Сока, ФК (1985). «H + - и Ca2 + -индуцированное слияние и дестабилизация липосом». Биохимия . 24 (13): 3099–106. DOI : 10.1021 / bi00334a005 . PMID 4027232 . 
  36. ^ Wilschut, Ян; Папахаджопулос, Деметриос (1979). «Ca2 + -индуцированное слияние фосфолипидных везикул, отслеживаемое смешиванием водного содержимого». Природа . 281 (5733): 690–2. Bibcode : 1979Natur.281..690W . DOI : 10.1038 / 281690a0 . PMID 551288 . S2CID 4353081 .  
  37. ^ Wilschut, Ян; Дузгунес, Неджат; Фрейли, Роберт; Папахаджопулос, Деметриос (1980). «Исследования механизма слияния мембран: кинетика слияния везикул фосфатидилсерина, индуцированного ионами кальция, с последующим новым анализом смешивания содержимого водных везикул». Биохимия . 19 (26): 6011–21. DOI : 10.1021 / bi00567a011 . PMID 7470445 . 
  38. ^ Дяо, Цзяцзе; Су, Цзэнлю; Ишицука, Юдзи; Лу, Бин; Ли, Кён Сок; Лай, Инь; Шин, Ён-Кюн; Ха, Таэкджип (2010). «Анализ смешивания содержимого одиночных везикул для слияния мембран, опосредованного SNARE» . Nature Communications . 1 (5): 1–6. Bibcode : 2010NatCo ... 1E..54D . DOI : 10.1038 / ncomms1054 . PMC 3518844 . PMID 20975723 .