Среда NYC ( Нью-Йорк ) или агар со средой GC ( Neisseria gonorrhoeae ) используется для выделения гонококков . [1]
Состав [ править ]
Основа агара состоит из: [1]
| Ингредиенты | Грамм на литр |
|---|---|
| Протеозный пептон | 15 |
| Кукурузный крахмал | 1 |
| Глюкоза | 5 |
| Натрия хлорид | 5 |
| Гидрофосфат калия | 4 |
| Дигидрофосфат калия | 1 |
| Агар | 20 |
Конечный pH (при 25 ° C) 7,4 ± 0,2
Предпосылки и принципы [ править ]
Основа агара Нью-Йорка была первоначально разработана Фауэром, Вейсбурдом и Уилсоном [1] [2] [3] в Департаменте здравоохранения Нью-Йорка для селективного выделения патогенных видов Neisseria из клинических образцов. Он состоит в основном из пептонно-кукурузного крахмального агарового основания, забуференного фосфатами и дополненного лошадиной плазмой , гемоглобином лошади , декстрозой , дрожжевым автолизатом и антибиотиками . [1] [2] Эта среда превосходит другие среды, обычно используемые для изоляции видов Neisseria . [1] [4][5] Прозрачный характер среды помогает в изучении колониальных типов. [6]
Протеозный пептон, лошадиная плазма, гемоглобин обеспечивают питательные вещества для роста N. gonorrhoeae и N. meningitidis . Фосфат буферизует среду. Добавленная селективная добавка содержит антибиотики ванкомицин , колистин , нистатин и триметоприм для подавления сопутствующей флоры. Ванкомицин является тормозным для грам-положительных бактерий. Колистин подавляет грамотрицательные бактерии, в том числе виды Pseudomonas , в то время как Proteus подавляется триметопримом.. [7] Комбинация триметоприма и колистина синергетически действует против грамотрицательных бактерий . [8] Крахмал нейтрализует токсичные метаболиты, производимые Neisseria . Добавка дрожжевого автолизата удовлетворяет требованиям CO2, необходимым для ускорения роста Neisseria . Дрожжи содержат щавелевоуксусную кислоту, которая метаболизируется гонококками с образованием СО2, достаточного для роста капнофильных гонококков. [9] Кроме того, присутствие дрожжевого автолизата снижает лаг-фазу роста Neisseria., таким образом увеличивая размер и количество колоний. Образец можно нанести штрихами на среду для получения максимальной изоляции.
Процедура [ править ]
Сделайте штриховку на образце как можно скорее после того, как он будет доставлен в лабораторию . Если материал культивируется непосредственно из тампона , действуйте следующим образом: [10]
- Вращайте тампон прямо на среде по большой букве «Z», чтобы обеспечить адекватное воздействие тампона на среду для переноса организмов .
- Сделайте перекрестную полоску Z-образной формы стерильной проволочной петлей , желательно в клинике . Если это не было сделано ранее, перекрестную штриховку следует провести в лаборатории.
- Как можно скорее поместите культуру в аэробную среду, обогащенную диоксидом углерода .
- Инкубируйте при 35 ± 2 ° C и исследуйте после инкубации в течение ночи и еще раз примерно через 48 часов.
- Субкультуру для идентификации N. gonorrhoeae необходимо произвести в течение 18–24 часов. При отправке после инкубации колонии следует пересеять перед проведением биохимических идентификационных тестов, чтобы гарантировать достижение адекватной жизнеспособности.
Ожидаемые результаты [ править ]
Типичная морфология колоний следующая: [7]
N. gonorrhoeae может выглядеть как маленькие (0,5–1,0 мм) серовато-белые или бесцветные слизистые колонии.N. meningitidis выглядит как большие бесцветные или голубовато-серые слизистые колонии.
Колонии могут быть выбраны для окрашивания по Граму , субкультивирования или других диагностических процедур.
Ссылки [ править ]
- ^ a b c d e Fauer, Weisburd, Wilson and May, 1973, Health Lab. Sci., 10: 44.
- ^ a b Фауэр, Вайсбурд и Уилсон, 1973, Лаборатория здоровья. Sci., 10: 55.
- ^ Fauer YC, Weisburd MH и Wilson ME, 1973, Lab Health Sci., 10 (2) 61.
- ^ Granato, Schneible-Смит и Weiner, 1981, J. Clin. Microbiol.13: 963.
- ^ Griffin PJ и Рейдер С.В., 1957, J. Biol. Мед., 29, 613
- ^ MacFaddin JF, 1985, Медиа для изоляции объясняющим-Identification-техническое обслуживание медицинских бактерий, Vol. 1, Уильямс и Уилкинс, Балтимор
- ^ а б Кнапп и Куманс. 1999. В Murray, Baron, Pfaller, Tenover and Yolken (ed.), Manual of Clinical Microbiology, 7th ed. Американское общество микробиологии, Вашингтон, округ Колумбия
- ^ . Simmons NA, 1970, J. Clin. Патол., 23, 757.
- ^ Лоутон и Кох, 1982, J. Clin. Microbiol., 20: 905.
- ^ Центр по контролю за заболеваниями. 1975. Критерии и методы диагностики гонореи, USPHS, Атланта, Джорджия.
