Аппаратная перфузия (МП) - это метод, используемый при трансплантации органов как средство сохранения органов , подлежащих трансплантации.
Аппаратная перфузия имеет различные формы и может быть разделена на категории в зависимости от температуры перфузата: холодная (4 ° C) и теплая (37 ° C). [1] Аппаратная перфузия применялась при трансплантации почек , [2] трансплантации печени [3] и трансплантации легких . [4] Это альтернатива статическому холодному хранению (SCS).
История методов сохранения почек
Важной подготовкой к развитию хранения и трансплантации почек была работа Алексиса Карреля по разработке методов сосудистого анастомоза . [5] Каррел описал первую трансплантацию почек, которая была проведена собакам в 1902 году; Ульман [6] независимо описал аналогичные эксперименты в том же году. В этих экспериментах почки пересаживались без каких-либо попыток хранения.
Решающим шагом в обеспечении возможности хранения почек in vitro была демонстрация Фурманом в 1943 г. [7] обратимого воздействия гипотермии на метаболические процессы в изолированных тканях. До этого почки хранились при нормальной температуре тела с использованием крови или разбавленных перфузатов крови [8] [9], но успешных реимплантаций не проводилось. Фурман показал, что срезы коры и мозга почек крыс выдерживали охлаждение до 0,2 ° C в течение одного часа, при которой потребление кислорода было минимальным. Когда ломтики снова нагревали до 37 ° C, их потребление кислорода восстановилось до нормального.
Благотворное влияние гипотермии на ишемических интактных почках было продемонстрировано Owens в 1955 году [10] , когда он показал , что, если собаки охлаждают до 23-26 ° С, и их грудной аорты были окклюзированы в течение 2 часов, их почки не показали никакого очевидного повреждения когда собак нагрели. Этот защитный эффект гипотермии на ишемическое повреждение почек был подтвержден Богардусом [11], который показал защитный эффект от поверхностного охлаждения почек собак, ножки которых были зажаты in situ в течение 2 часов. Мойер [12] продемонстрировал применимость этих экспериментов на собаках к человеку, продемонстрировав одинаковый эффект на функцию почек собаки и человека в одинаковые периоды гипотермической ишемии.
Только в 1958 году было показано, что неповрежденные почки собаки переживут ишемию даже лучше, если их охладить до более низких температур. Stueber [13] показал, что почки выжили бы при пережатии почечной ножки in situ в течение 6 часов, если бы почки были охлаждены до 0-5 ° C путем помещения в охлаждающую рубашку, а Schloerb [14] показал, что аналогичный метод с охлаждением гепаринизированных почек собаки до 2-4 ° C давали защиту на 8 часов, но не на 12 часов. Schloerb также предпринял попытку хранения in vitro и аутотрансплантации охлажденных почек и выжил после 4 часов хранения почек с последующей реимплантацией и немедленной контралатеральной нефрэктомией . Он также почти выжил после 24-часового хранения почек и отсроченной контралатеральной нефрэктомии у собаки, у которой развился поздний артериальный тромбоз почки.
Эти методы поверхностного охлаждения были усовершенствованы за счет внедрения методов, в которых сосудистая система почек промывалась холодной жидкостью перед хранением. Это привело к увеличению скорости охлаждения почек и удалению эритроцитов из сосудистой системы. Kiser [15] использовал этот метод для достижения успешного 7-часового хранения почки собаки in vitro, когда почка была промыта при 5 ° C смесью декстрана и разбавленной крови перед хранением. В 1960 году Лапчинский [16] подтвердил, что подобные периоды хранения возможны, когда он сообщил, что восемь собак выжили после того, как их почки хранились при 2-4 ° C в течение 28 часов с последующей аутотрансплантацией и отложенной контралатеральной нефрэктомией. Хотя Лапчинский не сообщил подробностей в своей статье, Хамфрис [17] сообщил, что эти эксперименты включали охлаждение почек в течение 1 часа холодной кровью, а затем хранение при 2-4 ° C с последующим согреванием почек в течение 1 часа теплой кровью. кровь на момент реимплантации. Контралатеральная нефрэктомия была отложена на два месяца.
Хамфрис [17] разработал эту технику хранения, непрерывно перфузируя почку в течение всего периода хранения. Он использовал разбавленную плазму или сыворотку в качестве перфузата и указал на необходимость низкого давления перфузата для предотвращения набухания почек, но признал, что оптимальные значения для таких переменных, как температура перфузата, Po 2 и поток, оставались неизвестными. Его лучшими результатами в это время были 2 собаки, которые выжили после хранения их почек в течение 24 часов при 4-10 ° C с последующей аутотрансплантацией и отложенной контралатеральной нефрэктомией через несколько недель.
Калне [18] поставил под сомнение необходимость использования методов непрерывной перфузии, продемонстрировав, что успешная 12-часовая консервация может быть достигнута с использованием гораздо более простых методов. У Калне была одна почка, поддерживающая жизнь, даже когда контралатеральная нефрэктомия выполнялась одновременно с операцией по реимплантации. Калне просто гепаринизировал почки собаки, а затем хранил их в растворе со льдом при 4 ° C. Хотя в одном эксперименте было показано, что 17-часовая консервация возможна, когда нефрэктомия откладывалась, при 24-часовом хранении успеха добиться не удалось.
Следующее достижение было сделано Хамфрисом [19] в 1964 году, когда он модифицировал перфузат, используемый в его первоначальной системе непрерывной перфузии, и получил собачью почку, способную поддерживать жизнь после 24-часового хранения, даже когда немедленная контралатеральная нефрэктомия была выполнена в одновременно с реимплантацией. В этих экспериментах в качестве перфузата использовалась аутогенная кровь, разбавленная на 50% раствором Tis-U-Sol при 10 ° C. Давление перфузата составляло 40 мм рт. Ст., РН перфузата 7,11-7,35 (при 37 ° C). Мембранное легкое использовалось для оксигенации, чтобы избежать повреждения крови.
Пытаясь улучшить эти результаты, Манакс [20] исследовал эффект гипербарического кислорода и обнаружил, что успешное 48-часовое хранение почек собаки было возможно при 2 ° C без использования непрерывной перфузии, когда почки промывались декстраном / Tis. - Раствор U-Sol перед хранением при давлении 7,9 атмосфер, и если контралатеральная нефрэктомия была отложена на срок от 2 до 4 недель после реимплантации. Манакс предположил, что гипербарический кислород может работать либо путем ингибирования метаболизма, либо путем содействия диффузии кислорода в клетки почек, но он не сообщил о контрольных экспериментах, чтобы определить, были ли другие аспекты его модели более важными, чем гипербарий.
Заметное улучшение времени хранения было достигнуто Белзером в 1967 году [21], когда он сообщил об успешном 72-часовом хранении почек после возвращения к использованию непрерывной перфузии с использованием перфузата на основе собачьей плазмы при 8-12 ° C. Белцер [22] обнаружил, что решающим фактором в обеспечении неосложненной 72-часовой перфузии является криопреципитация плазмы, используемой в перфузате, для уменьшения количества нестабильных липопротеинов, которые в противном случае выпадают в осадок из раствора и постепенно закупоривают сосудистую систему почек. Мембраны оксигенатор была также использована в системе в дальнейшей попытке предотвратить денатурацию из липо-протеинов , потому что только 35% из Липо-белков были удалены крио-осадков. Перфузат содержал 1 литр собачьей плазмы, 4 мг-экв сульфата магния, 250 мл декстрозы, 80 единиц инсулина, 200 000 единиц пенициллина и 100 мг гидрокортизона. Помимо криоосаждения , перфузат предварительно фильтровали через фильтр 0,22 мкм непосредственно перед использованием. Belzer использовал pH перфузата 7,4-7,5, Po 2 150-190 мм рт. Ст. И систолическое давление перфузата 50-80 мм рт. Ст. В аппарате, который создавал пульсирующий поток перфузата. Используя эту систему, у Белцера было 6 собак, выживших после того, как их почки хранились в течение 72 часов и затем повторно имплантировались, с немедленной контралатеральной нефрэктомией, выполняемой во время операций по реимплантации.
Использование Белзером гидрокортизона в качестве адъюванта к консервации было предложено Лотке в работе с срезами почек собак [23], в которых гидрокортизон улучшал способность срезов выводить ПАУ и кислород после 30 часов хранения при 2-4 ° C; Лотке предположил, что в этих экспериментах гидрокортизон может действовать как стабилизатор лизосомальной мембраны. Остальные компоненты модели Белцера были получены эмпирическим путем. Инсулин и магний частично использовались в попытке вызвать искусственную гибернацию , так как Суомалайнен [24] обнаружил, что этот режим эффективен для индуцирования гибернации у естественных гибернаторов. Магний также использовался в качестве метаболического ингибитора после того, как Камияма продемонстрировал [25], что он является эффективным средством сохранения сердца собак. Еще одним оправданием магния было то, что он был необходим для замены кальция, который был связан цитратом в плазме .
Белцер [26] продемонстрировал применимость своих экспериментов на собаках к хранению почек человека, когда он сообщил о своем опыте трансплантации почки человека с использованием тех же методов хранения, которые он использовал для почек собаки. Он мог хранить почки до 50 часов, и только 8% пациентов нуждались в послеоперационном диализе, когда донор был хорошо подготовлен.
В 1968 г. Хамфрис [27] сообщил об одном выжившем из 14 собак после 5-дневного хранения почек в перфузионном аппарате при 10 ° C с использованием разбавленной плазменной среды, содержащей дополнительные жирные кислоты. Однако отсроченная контралатеральная нефрэктомия через 4 недели после реимплантации была необходима в этих экспериментах для достижения успеха, и это указывало на то, что почки были серьезно повреждены во время хранения.
В 1969 году Коллинз [28] сообщил об улучшении результатов, которые могут быть достигнуты с помощью простых неперфузионных методов хранения в почках при гипотермии. Он основал свою технику на наблюдении Келлера [29], что потерю электролитов из почек во время хранения можно предотвратить путем использования жидкости для хранения, содержащей катионы в количествах, приближающихся к тем, которые обычно присутствуют в клетках. В модели Коллинза собаки были хорошо гидратированы перед нефрэктомией, а также получали маннит, чтобы вызвать диурез. Феноксибензамин, вазодилататор и стабилизатор лизозомальных ферментов [30] [31], вводили в почечную артерию перед нефрэктомией. Сразу после удаления почки погружали в физиологический раствор и перфузировали через почечную артерию 100–150 мл холодного раствора электролита с высоты 100 см. Почки оставались в замороженном физиологическом растворе до конца периода хранения. Раствор, использованный для этих успешных холодных перфузий, имитировал электролитный состав внутриклеточных жидкостей за счет содержания большого количества калия и магния. Раствор также содержал глюкозу, гепарин, новокаин и феноксибензамин. PH раствора составлял 7,0 при 25 ° C. Коллинзу удалось добиться успешного 24-часового хранения 6 почек и 30-часового хранения 3 почек, при этом почки функционировали сразу после реимплантации, несмотря на немедленную контралатеральную нефрэктомию. Коллинз подчеркнул плохие результаты, полученные при промывке раствором Рингера, обнаружив аналогичные результаты при таком лечении по сравнению с почками, обработанными только поверхностным охлаждением. Лю [32] сообщил, что раствор Коллинза может успешно храниться в течение 48 часов, если раствор был модифицирован путем включения аминокислот и витаминов. Однако Лю не проводил контрольных экспериментов, чтобы показать, что эти модификации были решающими.
Другие исследователи обнаружили трудности в повторении успешных экспериментов Белзера с 72-часовым перфузионным хранением. Вудсу [33] удалось добиться успешного 48-часового хранения 3 из 6 почек, когда он использовал добавки Belzer с криопреципитированной плазмой в качестве перфузата в системе гипотермической перфузии, но ему не удалось продлить время хранения до 72 часов, поскольку Белзер сделал это. Однако позже Вудс [34] добился успешного хранения почек собаки в течение 3 и 7 дней. Вудс модифицировал перфузат Белцера, добавив 250 мг метилпреднизолона, увеличил содержание сульфата магния до 16,2 мЭкв и инсулина до 320 единиц. Шесть из 6 почек обеспечили функцию поддержания жизни, когда они были повторно имплантированы после 72 часов хранения, несмотря на немедленную контралатеральную нефрэктомию; 1 из 2 почек обеспечивала функцию поддержания жизни после 96 часов хранения, 1 из 2 - после 120 часов хранения и 1 из 2 - после 168 часов хранения. Давление перфузата составляло 60 мм рт. Ст. При скорости перфузатного насоса 70 ударов в минуту, а pH перфузата автоматически поддерживался на уровне 7,4 с помощью титратора CO 2 . Вудс подчеркнул важность гидратации животных-доноров и реципиентов. Вудс обнаружил, что без метилпреднизолона проблема хрупкости сосудов возникает, когда время хранения превышает 48 часов.
Значительное упрощение методов гипотермического перфузионного хранения было сделано Джонсоном [35] и Класом в 1972 году [36] с введением перфузата на основе альбумина. Этот перфузат устраняет необходимость в производстве криопреципитированной и миллипор-фильтрованной плазмы, используемой Belzer. Приготовление этого перфузата было трудоемким и длительным, и существовал потенциальный риск со стороны вируса гепатита и цитотоксических антител. Отсутствие липопротеинов в перфузате означало, что мембранный оксигенатор можно исключить из контура перфузии, поскольку не было необходимости избегать взаимодействия перфузат / воздух для предотвращения осаждения липопротеинов. Оба рабочих использовали одни и те же добавки, рекомендованные Belzer.
Раствор, который использовал Джонсон, был приготовлен Лабораторией продуктов крови (Элстри, Англия) путем извлечения термолабильного фибриногена и гамма-глобулинов из плазмы с получением раствора фракции белков плазмы (PPF). Раствор инкубировали при 60 ° C в течение 10 часов для инактивации возбудителя сывороточного гепатита. [37] Результатом стал раствор человеческого альбумина с концентрацией 45 г / л, содержащий небольшие количества гамма- и бета-глобулинов, который был стабильным при температуре от 0 ° C до 30 ° C в течение 5 лет. [38] PPF содержал 2,2 ммоль / л свободных жирных кислот. [39]
Эксперименты Джонсона [35] были в основном связаны с хранением почек, поврежденных длительным тепловым повреждением. Тем не менее, в контрольной группе с нетепловыми повреждениями почек собаки Джонсон показал, что 24-часовая сохранность была легко достигнута при использовании перфузата PPF, и он описал в другом месте [40] выжившего после 72-часовой перфузии и реимплантации с немедленной контралатеральной нефрэктомией. При теплой травме почек перфузия PPF дала лучшие результаты, чем метод Коллинза: 6 из 6 собак выжили после 40-минутной теплой травмы и 24-часового хранения с последующей реимплантацией почек и немедленной контралатеральной нефрэктомией. Калий, магний, инсулин, глюкоза, гидрокортизон и ампициллин были добавлены в раствор PPF, чтобы обеспечить источник энергии и предотвратить утечку внутриклеточного калия. Температура перфузата составляла 6 ° С, давление 40–80 мм рт. Ст., Po 2 200–400 мм рт. PH поддерживали от 7,2 до 7,4.
Claes [36] использовал перфузат на основе человеческого альбумина (Kabi: Швеция), разбавленный физиологическим раствором до концентрации 45 г / л. Клаас сохранил 4 из 5 почек собаки в течение 96 часов, при этом почки функционировали сразу после реимплантации, несмотря на немедленную контралатеральную нефрэктомию. Клаас также сравнил этот перфузат с криопреципитированной плазмой Белцера в контрольной группе и не обнаружил существенной разницы между функцией повторно имплантированных почек в двух группах.
Единственной другой группой, помимо Вудса, сообщившей об успешном семидневном хранении почек, были Лю и Хамфрис [41] в 1973 году. У них были выжившие три из семи собак после того, как их почки хранились в течение семи дней с последующей реимплантацией и немедленной контралатеральной терапией. нефрэктомия. Их лучшая собака имела пик креатинина после реимплантации 50 мг / л (0,44 ммоль / л). Лю использовал хорошо гидратированных собак, перенесших маннитоловый диурез, и хранил почки при 9-10 ° C, используя перфузат, полученный из человеческого PPF. PPF был дополнительно фракционирован с использованием хорошо растворимого в воде полимера (Pluronic F-38), и ацетилтриптофанат натрия и каприлат натрия были добавлены к PPF в качестве стабилизаторов для обеспечения пастеризации. К этому раствору добавляли человеческий альбумин, гепарин, маннит, глюкозу, сульфат магния, хлорид калия, инсулин, метилпреднизолон, карбенициллин и воду, чтобы довести осмоляльность до 300-310 мосмоль / кг. Перфузат заменяли через 3,5 дня хранения. Давление перфузата составляло 60 мм рт.ст. или меньше при скорости нагнетания 60 в минуту. PH перфузата составлял 7,12–7,32 (при 37 ° C), Pco2 27–47 мм рт. Ст. И Po 2 173–219 мм рт. В следующем отчете об этом исследовании Хамфрис [42] обнаружил, что при повторении экспериментов с новой партией PPF выживших не было, а гистология выживших из первоначального эксперимента показала гиперцеллюлярность клубочков, которую он приписал возможному токсическому эффекту Полимер Плюроник.
Джойс и Проктор [43] сообщили об успешном использовании простого перфузата на основе декстрана для 72-часового хранения почек собаки. 10 из 17 почек оказались жизнеспособными после реимплантации и немедленной контралатеральной нефрэктомии. Джойс использовал непульсирующую перфузию при 4 ° C с перфузатом, содержащим 2,1% декстрана 70 (Pharmacia), с дополнительными электролитами, глюкозой (19,5 г / л), прокаином и гидрокортизоном. Перфузат не содержал плазмы или компонентов плазмы. Давление перфузата составляло всего 30 см H 2 O, pH 7,34-7,40 и Po 2 250-400 мм рт. Эта работа показала, что для 72-часового хранения не требуются никакие питательные вещества, кроме глюкозы, а также достаточно низкие перфузатное давление и потоки.
В 1973 г. Сакс [44] показал, что простое хранение льда может быть успешно использовано для хранения в течение 72 часов, когда для начального охлаждения и промывания почек использовался новый промывочный раствор. Мешок удалял почки у хорошо гидратированных собак, у которых был диурез после инфузии маннита, и промывал почки 200 мл раствора с высоты 100 см. Затем почки просто выдерживали при 2 ° C в течение 72 часов без дополнительной перфузии. После реимплантации немедленно выполнили контралатеральную нефрэктомию. Промывочный раствор был разработан для имитации состава внутриклеточной жидкости и содержал маннит в качестве непроницаемого иона для дальнейшего предотвращения набухания клеток. Осмоляльность раствора составляла 430 мосмоль / кг, а его pH составлял 7,0 при 2 ° C. Добавки, которые использовались Коллинзом (декстроза, феноксибензамин, прокаин и гепарин), были исключены Sacks.
Эти результаты были сопоставлены Россом [45], который также достиг успешного 72-часового хранения без использования непрерывной перфузии, хотя он не смог воспроизвести результаты Коллинза или Сакса с использованием исходных растворов Коллинза или Сакса. Успешный раствор Росса был похож по составу электролита на внутриклеточную жидкость с добавлением гипертонического цитрата и маннита. В растворе не было фосфатов, бикарбонатов, хлоридов или глюкозы; осмоляльность составляла 400 мосмоль / кг и pH 7,1. Пять из 8 собак пережили повторную имплантацию почек и немедленную контралатеральную нефрэктомию, когда почки хранились в течение 72 часов после промывания раствором Росса; но Росс не смог достичь 7-дневного хранения с помощью этой техники, даже когда использовалась отсроченная контралатеральная нефрэктомия.
Требования для успешного 72-часового гипотермического перфузионного хранения были дополнительно определены Коллинзом, который показал, что пульсирующая перфузия не нужна, если использовалось перфузатное давление 49 мм рт. Ст., И что температура 7 ° C была лучше для хранения, чем 2 ° C. или 12 ° C. [46] [47] Он также сравнил различные композиции перфузата и обнаружил, что перфузат с фосфатным буфером может быть успешно использован, что устраняет необходимость в подаче диоксида углерода. [48] Grundmann [49] также показал, что достаточно низкого давления перфузата. Он использовал среднее пульсирующее давление 20 мм рт. Ст. При 72-часовой перфузии и обнаружил, что это дает лучшие результаты, чем среднее давление 15, 40, 50 или 60 мм рт.
Коэн [50] сообщил об успешном хранении до 8 дней с использованием различных типов перфузата, причем наилучший результат был получен при использовании перфузата с фосфатным буфером при 8 ° C. Считалось, что невозможность повторить эти успешные эксперименты связана с изменениями, которые были внесены в способ производства PPF с более высоким содержанием октановой кислоты, что является вредным. Было показано, что октановая кислота способна стимулировать метаболическую активность во время гипотермической перфузии [51], и это может быть вредным.
Характер сохраняющего повреждения почек
Структурная травма
Структурные изменения , которые происходят в течение 72-часового гипотермии хранения ранее неповрежденных почек были описаны Маккей [52] , который показал , как было прогрессивное Вакуолизация из цитоплазмы клеток , которые особенно повлияли на проксимальных канальцев . При электронной микроскопии было замечено, что митохондрии набухают с ранним разделением внутренних кристаллических мембран и более поздней потерей всей внутренней структуры. Лизосомная целостность хорошо сохранялась до позднего времени, и разрушение клетки, по-видимому, не было вызвано литическими ферментами, потому что не было больше повреждений, непосредственно прилегающих к лизосомам, чем в остальной части клетки.
Вудс [34] [53] и Лю [41] - при описании успешного 5- и 7-дневного хранения почек - описали световые микроскопические изменения, наблюдаемые в конце перфузии и при вскрытии, но обнаружили несколько грубых аномалий, кроме некоторой инфильтрации лимфоцитами. и случайная атрофия канальцев.
Изменения во время короткой перфузии почек человека перед реимплантацией были описаны Хиллом [54], который также выполнил биопсию через 1 час после реимплантации. С помощью электронной микроскопии Хилл обнаружил повреждение эндотелия, которое коррелировало с тяжестью отложения фибрина после реимплантации. Изменения, которые Хилл видел в клубочках при световой микроскопии, были случайными фибриновыми тромбами и инфильтрацией полиморфов. Хилл подозревал, что эти изменения были иммунологически индуцированным поражением, но обнаружил, что не было никакой корреляции между тяжестью гистологического поражения и наличием или отсутствием отложений иммуноглобулина.
Есть несколько отчетов об анализе мочи, производимой почками во время перфузионного хранения. Кастагир [55] проанализировал мочу, образовавшуюся во время 24-часовой перфузии, и обнаружил, что это ультрафильтрат перфузата, Скотт [56] обнаружил след белка в моче во время 24-часового хранения, а Педерсон [57] обнаружил только следы. белка после 36 часов перфузионного хранения. Педерсон упомянул, что во время более ранних экспериментов он обнаружил сильную протеинурию. Вудс [53] отметил белковые цилиндры в канальцах жизнеспособных почек после 5-дневного хранения, но не проанализировал мочу, образующуюся во время перфузии. В исследовании Коэна [50] наблюдалось постепенное увеличение концентрации белка в моче в течение 8 дней хранения до тех пор, пока содержание белка в моче не сравнялось с содержанием белка в перфузате. Это могло быть связано с набуханием базальных мембран клубочков и прогрессирующим слиянием отростков стопы эпителиальных клеток, которое также наблюдалось в течение того же периода перфузионного накопления.
Механизмы травмы
Механизмы, которые повреждают почки при гипотермическом хранении, можно подразделить следующим образом:
- Повреждение метаболических процессов клетки, вызванное:
- Холодный
- Аноксия, когда почка теплая как до, так и после периода гипотермического хранения.
- Отсутствие правильных питательных веществ.
- Накопление токсинов в перфузате.
- Токсическое повреждение от жидкости для хранения.
- Вымывание необходимых субстратов из клеток почек.
- Повреждение ядерной ДНК.
- Механическое повреждение сосудистой системы почки при гипотермической перфузии.
- Постреимплантационная травма.
Метаболическая травма
Холодный
При нормальных температурах механизмы перекачки в клеточных стенках удерживают внутриклеточный калий на высоком уровне и вытесняют натрий. Если эти насосы выходят из строя, клетки поглощают натрий и теряют калий. Вода пассивно следует за натрием и приводит к набуханию клеток. Важность этого контроля набухания клеток была продемонстрирована McLoughlin [58], который обнаружил значительную корреляцию между содержанием воды в корковом веществе почек собак и способностью почек поддерживать жизнь после 36-часового хранения. Насосный механизм управляется ферментной системой, известной как Na + K + - активированная АТФаза [59], и подавляется холодом. Леви [60] обнаружил, что метаболическая активность при 10 ° C, на что указывают измерения потребления кислорода, снижается примерно до 5% от нормы, и, поскольку все ферментные системы одинаково подвержены влиянию гипотермии, активность АТФазы заметно снижается при 10 ° C. ° C.
Однако существуют тканевые и видовые различия в чувствительности этой АТФазы к холоду, что может объяснить различия в способности тканей противостоять переохлаждению. Мартин [61] показал, что в клетках коры почек собаки некоторая активность АТФазы все еще присутствует при 10 ° C, но не при 0 ° C. В печени и сердце активность клеток полностью подавлялась при 10 ° C, и эта разница в чувствительности к холоду АТФазы коррелировала с большей трудностью в контроле набухания клеток во время гипотермического хранения клеток печени и сердца. Отдельная АТФаза обнаруживается в стенках сосудов, и Белцер [62] показал, что это полностью ингибируется при 10 ° C, когда при этой температуре АТФаза кортикальных клеток почек все еще активна. Эти эксперименты проводились на эндотелии аорты, но если эндотелий сосудов почек обладает такими же свойствами, то повреждение сосудов может быть ограничивающим фактором при длительном хранении почек.
Уиллис [63] показал, как гибернаторы получают часть своей способности выживать при низких температурах благодаря наличию Na + K + -АТФазы, которая способна активно переносить натрий и калий через их клеточные мембраны при 5 ° C, что примерно в шесть раз быстрее, чем в естественных условиях. не спящие; этой скорости переноса достаточно, чтобы предотвратить набухание клеток.
Скорость охлаждения ткани также может иметь значение для повреждения ферментных систем. Франкавилла [64] показал, что при быстром охлаждении срезов печени (немедленное охлаждение до 12 ° C за 6 минут) анаэробный гликолиз, измеренный при повторном нагревании до 37 ° C, ингибировался примерно на 67% активности, которая была продемонстрирована на срезах, которые подвергся отложенному охлаждению. Однако срезы почек собаки пострадали от быстрого охлаждения в меньшей степени, чем срезы печени.
Аноксия
Все клетки нуждаются в АТФ в качестве источника энергии для своей метаболической активности. Почки повреждаются из-за аноксии, когда клетки коры почек не могут генерировать достаточное количество АТФ в анаэробных условиях для удовлетворения потребностей клеток. При иссечении почки некоторая аноксия неизбежна в промежутке между разделением почечной артерии и охлаждением почки. Бергстром [65] показал, что 50% содержания АТФ в кортикальных клетках почек собаки теряется в течение 1 минуты после пережатия почечной артерии, и аналогичные результаты были получены Warnick [66] в почках целых мышей с уменьшением содержания АТФ. клеточный АТФ на 50% примерно через 30 секунд теплой аноксии. Варник и Бергстром также показали, что охлаждение почки сразу после удаления заметно снижает дальнейшую потерю АТФ. Когда эти не поврежденные теплом почки были перфузированы оксигенированной гипотермической плазмой, уровни АТФ снизились на 50% после 24-часового хранения, а через 48 часов средние тканевые уровни АТФ были немного выше, чем это указывает на синтез АТФ. Пегг [67] показал, что почки кролика могут ресинтезировать АТФ после периода перфузионного хранения после теплового повреждения, но ресинтез не происходит в почках, не поврежденных теплом.
Теплая аноксия также может возникнуть во время реимплантации почки после хранения. Ланнон [68] путем измерения метаболизма сукцината показал, что почки более чувствительны к периоду теплой гипоксии, возникающей после хранения, чем к тому же периоду теплой гипоксии, происходящему непосредственно перед хранением.
Недостаток необходимых питательных веществ
Активный метаболизм глюкозы с образованием бикарбоната был продемонстрирован Петтерссоном [69] и Коэном. [50]
Исследования Петтерссона [69] были посвящены метаболизму глюкозы и жирных кислот почками в течение 6 дней гипотермического перфузионного хранения, и он обнаружил, что почки потребляли глюкозу в количестве 4,4 мкмоль / г / день и жирные кислоты в количестве 5,8 мкмоль / г / день. В исследовании Коэна [50] лучшие почки с 8-дневным хранением потребляли глюкозу со скоростью 2,3 мкмоль / г / день и 4,9 мкмоль / г / день соответственно, что позволяло предположить, что они использовали жирные кислоты с такой же скоростью, что и почки собак Петтерссона. . Постоянство как скорости потребления глюкозы, так и скорости производства бикарбоната означало, что никакое повреждение не влияло на гликолитические ферменты или ферментные системы карбоангидразы.
Ли [70] показал, что жирные кислоты являются предпочтительным субстратом коры почек кролика при нормотермических температурах, а глюкоза - предпочтительным субстратом для медуллярных клеток, которые обычно метаболизируются анаэробно. Abodeely [71] показал, что и жирные кислоты, и глюкоза могут использоваться внешним мозговым веществом почек кролика, но глюкоза использовалась преимущественно. При гипотермии метаболические потребности почек значительно снижаются, но наблюдается измеримое потребление глюкозы, жирных кислот и кетоновых тел. Хорсбург [72] показал, что липиды утилизируются гипотермическими почками, при этом потребление пальмитата составляет 0-15% от нормы в коре головного мозга крыс при 15 ° C. Петтерссон [69] показал, что на молярной основе глюкоза и жирные кислоты метаболизируются почками с гипотермической перфузией примерно с одинаковой скоростью. Хуанг [73] показал, что кора гипотермической почки собаки теряет липиды (потеря 35% общих липидов через 24 часа), если олеат не был добавлен к перфузату почек. Хуанг прокомментировал, что эта потеря может повлиять на структуру клетки, и что потеря также предполагает, что почка использует жирную кислоту. В более поздней публикации Хуанг [74] показал, что срезы коры головного мозга собаки метаболизируют жирные кислоты, но не глюкозу, при 10 ° C.
Даже если введены правильные питательные вещества, они могут быть потеряны из-за всасывания в трубки системы консервирования. Lee [75] продемонстрировал, что силиконовый каучук (материал, широко используемый в системах сохранения почек) абсорбировал 46% олеиновой кислоты перфузата через 4 часа перфузии.
Накопление токсинов
Abouna [76] показал, что аммиак выделялся в перфузат в течение 3 дней хранения в почках, и предположил, что он может быть токсичным для клеток почек, если его не удалить путем частой замены перфузата. Некоторая поддержка использования перфузатного обмена во время длительных перфузий была предоставлена Лю [41], который использовал перфузатный обмен в своих успешных экспериментах по 7-дневному хранению. Grundmann [77] также обнаружил, что качество 96-часовой консервации было улучшено за счет использования двойного объема перфузата или перфузатного обмена. Однако выводы Грундманна были основаны на сравнении с контрольной группой, состоящей всего из 3 собак. Коэн [50] не смог продемонстрировать образование аммиака в течение 8 дней перфузии и отсутствие пользы от обмена перфузата; Было показано, что прогрессирующая щелочность, возникающая во время перфузии, связана с образованием бикарбоната.
Токсическое повреждение перфузата
Было показано, что некоторые перфузаты оказывают токсическое действие на почки в результате непреднамеренного включения определенных химических веществ в их состав. Коллинз [78] показал, что прокаин, входящий в состав его промывочных жидкостей, может быть токсичным, а Пегг [79] прокомментировал, как токсичные материалы, такие как пластификаторы ПВХ, могут вымываться из трубок перфузионного контура. Dvorak [80] показал, что добавление метил-преднизолона к перфузату, которое Вудс [53] считал необходимым, может в некоторых обстоятельствах быть вредным. Он показал, что с более чем г метилпреднизолона в 650 мл перфузата (по сравнению с 250 мг в 1 литре, использованным Вудсом) необратимые гемодинамические и структурные изменения вызывались в почках после 20 часов перфузии. Наблюдались некроз капиллярных петель, закупорка пространств Боумена, утолщение базальной мембраны и повреждение эндотелиальных клеток.
Вымывание основных субстратов
Уорник [81] считал, что уровень нуклеотидов, оставшихся в клетке после хранения, важен для определения того, сможет ли клетка повторно синтезировать АТФ и восстановиться после повторного согревания. Частая смена перфузата или использование большого объема перфузата имеет теоретический недостаток, заключающийся в том, что расщепленные нуклеотиды аденина могут вымываться из клеток и, таким образом, быть недоступными для повторного синтеза в АТФ при повторном нагревании почки.
Повреждение ядерной ДНК
Ядерная ДНК повреждается при хранении почек в холодильнике. Lazarus [82] показал, что разрывы однонитевой ДНК происходят в течение 16 часов в почках мышей, хранящихся в гипотермическом режиме, при этом повреждение немного подавляется хранением в растворах Коллинза или Сакса. Это ядерное повреждение отличалось от повреждения, наблюдаемого при тепловом повреждении, когда происходили двухцепочечные разрывы ДНК. [83]
Механическое повреждение сосудистой системы
Методы перфузионного хранения могут механически повредить эндотелий сосудов почки, что приведет к артериальному тромбозу или отложению фибрина после реимплантации. Hill [54] отметил, что в почках человека отложение фибрина в клубочках после реимплантации и послеоперационная функция коррелируют с продолжительностью перфузионного накопления. Он взял биопсию при реваскуляризации из почек человека, сохраненных перфузией или хранением льда, и показал с помощью электронной микроскопии, что нарушение эндотелия происходит только в тех почках, которые были перфузированы. Биопсия, проведенная через час после реваскуляризации, показала, что тромбоциты и фибрин прикреплены к любым участкам обнаженной базальной мембраны сосудов. Другой тип сосудистого повреждения был описан Шейлом [84], который показал, как струйное поражение может образовываться дистальнее канюли, привязанной к почечной артерии, приводя к артериальному тромбозу примерно на 1 см дистальнее места канюли.
Постреимплантационная травма
Имеются данные о том, что иммунологические механизмы могут повредить почки с гипотермической перфузией после реимплантации, если перфузат содержал специфические антитела. Кросс [85] описал две пары почек трупа человека, которые перфузировали одновременно криопреципитированной плазмой, содержащей типоспецифические HLA-антитела к одной из пар. Обе эти почки перенесли ранний артериальный тромбоз. Лайт [86] описал подобное сверхострое отторжение после перфузионного хранения и показал, что использованная криопреципитированная плазма содержала цитотоксические антитела IgM. Эта потенциальная опасность использования криопреципитированной плазмы была экспериментально продемонстрирована Фило [87], который перфузировал почки собак в течение 24 часов специфически сенсибилизированной криопреципитированной плазмой собак и обнаружил, что он может вызывать клубочковые и сосудистые поражения с нагрубанием капилляров, эндотелиальным набуханием, инфильтрацией полиморфно-ядерными лейкоцитами и др. артериальный тромбоз. Иммунофлуоресцентная микроскопия показала специфическое связывание IgG вдоль эндотелиальных поверхностей, в клубочках, а также в сосудах. После реимплантации фиксация комплемента и повреждение тканей происходили по аналогичной схеме. Существует некоторая корреляция между тяжестью гистологического повреждения и последующей функцией почек.
Многие работники пытались предотвратить повторное согревание почек во время реимплантации, но только Коэн описал использование системы активного охлаждения. [50] Измерения высвобождения лизосомальных ферментов из почек, подвергнутых фиктивному анастомозу, как в системе охлаждения, так и вне ее, продемонстрировали, насколько чувствительны почки к согреванию после периода хранения в холодильнике, и подтвердили эффективность системы охлаждения в предотвращении фермента релиз. Еще одним фактором минимизации травм при операциях реимплантации могло быть то, что почки поддерживались при температуре 7 ° C в охлаждающем змеевике, что было в пределах некоторой степени температуры, используемой во время перфузионного хранения, так что почки не подвергались большему воздействию изменения температуры, которые произошли бы, если бы использовалось охлаждение льдом.
Dempster [88] описал использование медленного освобождения сосудистых зажимов в конце операции по реимплантации почки, чтобы избежать повреждения почки, но другие исследователи не упомянули, использовали ли они этот маневр. После того, как Коэн обнаружил сосудистое повреждение с внутрипочечным кровотечением через 3 дня перфузионного хранения [50], во всех последующих экспериментах использовалась методика медленной реваскуляризации с целью дать внутрипочечным сосудам время для восстановления своего тонуса в достаточной степени, чтобы предотвратить полное систолическое давление, оказываемое на хрупкие сосуды клубочков. Отсутствие серьезных повреждений сосудов при последующих перфузиях может быть связано с использованием этого маневра.
Рекомендации
- ^ Кей, Марк Д .; Хосгуд, Сара А .; Харпер, Саймон Дж. Ф.; Багул, Атул; Уоллер, Хелен Л .; Николсон, Майкл Л. (ноябрь 2011 г.). «Нормотермическая промывка по сравнению с гипотермической промывкой Ex vivo с использованием нового не содержащего фосфатов консервационного раствора (AQIX) в почках свиней». Журнал хирургических исследований . 171 (1): 275–282. DOI : 10.1016 / j.jss.2010.01.018 . PMID 20421110 .
- ^ Йонг, Сисси; Хосгуд, Сара А .; Николсон, Майкл Л. (июнь 2016 г.). «Нормотермическая перфузия ex vivo при трансплантации почки: прошлое, настоящее и будущее». Текущее мнение о трансплантации органов . 21 (3): 301–307. DOI : 10,1097 / MOT.0000000000000316 . ISSN 1087-2418 . PMID 27145197 . S2CID 22627245 .
- ^ Ceresa, Carlo DL; Насралла, Дэвид; Coussios, Константин Ц .; Друг, Питер Дж. (Февраль 2018 г.). «Случай нормотермической машинной перфузии при трансплантации печени: Ceresa et al» . Трансплантация печени . 24 (2): 269–275. DOI : 10.1002 / lt.25000 . PMID 29272051 .
- ^ Сайпел, Марсело; Юнг, Джонатан С .; Лю, Минъяо; Анраку, Масаки; Чен, Фэнши; Каролак, Войтек; Сато, Масааки; Ларатта, Джейн; Азад, Сасан; Мадоник, Минди; Чоу, Чунг-Вай (2011-04-14). «Нормотермическая перфузия легких Ex vivo в клинической трансплантации легких» (PDF) . Медицинский журнал Новой Англии . 364 (15): 1431–1440. DOI : 10.1056 / NEJMoa1014597 . ISSN 0028-4793 . PMID 21488765 . S2CID 10576812 . Архивировано из оригинального (PDF) 22 февраля 2020 года.
- ^ Каррель А. (1902 г.). «Операционная техника анастомоза сосудов и трансплантация внутренних органов». Lyon Med . 98 : 859–864.
- ^ Ульман Э. (1902). "Experimentalle Nierentransplantation". Wein Klin Wochschr . 15 : 281–282.
- ^ Фурман Ф.А., Поле J (1943). «Обратимость угнетения метаболизма мозга и почек крыс холодом» . Am J Physiol . 139 (2): 193–196. DOI : 10,1152 / ajplegacy.1943.139.2.193 .
- ^ Каррел А., Линдберг, Калифорния (1935). «Культура целых органов» . Наука . 81 (2112): 621–623. Bibcode : 1935Sci .... 81..621C . DOI : 10.1126 / science.81.2112.621 . PMID 17733174 . S2CID 19034161 .
- ^ Бейнбридж Ф.А., Эванс К.Л. (1914). «Препарат для сердца, легких, почек» . J Physiol . 48 (4): 278–286. DOI : 10.1113 / jphysiol.1914.sp001661 . PMC 1420524 . PMID 16993254 .
- ^ Оуэнс, Дж. Катберт (1955-01-01). «Длительная экспериментальная окклюзия грудной аорты во время гипотермии». Архив хирургии . 70 (1): 95–7. DOI : 10,1001 / archsurg.1955.01270070097016 . ISSN 0004-0010 . PMID 13217608 .
- ^ Богардус Г.М., Шлоссер Р.Дж. (1956). «Влияние температуры на ишемическое поражение почек». Хирургия . 39 (6): 970–974. PMID 13324611 .
- ^ Мойер, Джон Х .; Моррис, Джордж; Дебейки, Майкл Э. (январь 1957 г.). «Гипотермия: I. Влияние на почечную гемодинамику и выделение воды и электролитов у собак и людей» . Анналы хирургии . 145 (1): 26–40. DOI : 10.1097 / 00000658-195701000-00003 . ISSN 0003-4932 . PMC 1465379 . PMID 13395281 .
- ^ Stueber, P .; Ковач, С .; Колецкий, С .; Перский, Л. (июль 1958 г.). «Регионарное переохлаждение почек». Хирургия . 44 (1): 77–83. ISSN 0039-6060 . PMID 13556447 .
- ^ Schloerb, PR; Вальдорф, РД; Welsh, JS (ноябрь 1959 г.). «Защитный эффект гипотермии почек на общую ишемию почек». Хирургия, гинекология и акушерство . 109 : 561–565. ISSN 0039-6087 . PMID 14442912 .
- ^ Kiser, JC; Фарли, HH; Мюллер, Г.Ф .; Strobel, CJ; Хичкок, CR (1960). «Успешные аутотрансплантаты почек у собак после семи часов селективного охлаждения почек». Хирургический форум . 11 : 26–28. ISSN 0071-8041 . PMID 13756355 .
- ^ Лапчинский А.Г. (1960). «Последние результаты экспериментальной трансплантации сохранившихся конечностей и почек и возможное использование этой техники в клинической практике». Ann NY Acad Sci . 87 (1): 539–569. Bibcode : 1960NYASA..87..539L . DOI : 10.1111 / j.1749-6632.1960.tb23220.x . PMID 14414086 . S2CID 41367748 .
- ^ а б Хамфрис А.Л .; Russell R; Остафин Дж; Гудрич С.М.; Морец WH (1962). «Успешная реимплантация почки собаки после 24-часового хранения». Хирургический форум . 13 : 380–382. PMID 13955710 .
- ^ Calne, RY; Пегг, Германия; Pryse-Davies, J .; Браун, Флорида (1963-09-14). «Сохранение почек с помощью охлаждения льдом» . BMJ . 2 (5358): 640–655. DOI : 10.1136 / bmj.2.5358.640-а . ISSN 0959-8138 . PMC 1872740 . PMID 14046169 .
- ^ Хамфрис, Алабама; Морец, WH; Пирс, ЕС (апрель 1964 г.). «Двадцать четыре часа хранения почек с отчетом об успешной аутотрансплантации собак после тотальной нефрэктомии». Хирургия . 55 : 524–530. ISSN 0039-6060 . PMID 14138017 .
- ^ Манакс, Уильям Г. (1965-05-31). «Гипотермия и гипербария: простой метод сохранения всего органа». ДЖАМА . 192 (9): 755–9. DOI : 10.1001 / jama.1965.03080220019004 . ISSN 0098-7484 . PMID 14285707 .
- ^ Belzer, Folkert O .; Эшби, Б. Стерри; Данфи, Дж Энглберт (сентябрь 1967). «24-часовое и 72-часовое сохранение почек собак». Ланцет . 290 (7515): 536–539. DOI : 10.1016 / S0140-6736 (67) 90498-9 . PMID 4166894 .
- ^ Belzer, Folkert O .; Эшби, Б. Стерри; Хуанг, Жозефина С .; Данфи, Дж. Энглеберт (сентябрь 1968 г.). «Этиология повышения перфузионного давления при перфузии изолированного органа» . Анналы хирургии . 168 (3): 382–391. DOI : 10.1097 / 00000658-196809000-00008 . ISSN 0003-4932 . PMC 1387342 . PMID 4877588 .
- ^ Лотке П.А. (1966). «Лизосомостабилизирующие агенты для сохранения гипотермических почек» . Природа . 212 (5061): 512–513. Bibcode : 1966Natur.212..512L . DOI : 10.1038 / 212512a0 . PMID 5339142 .
- ^ Суомалайнен П. (1938). «Продукция искусственной спячки». Природа . 142 (3609): 1157. Bibcode : 1938Natur.142.1157S . DOI : 10.1038 / 1421157a0 . S2CID 4087215 .
- ^ Камияма, Тейко М. (1970-05-01). «Сохранение аноксического сердца с помощью метаболического ингибитора и гипотермии». Архив хирургии . 100 (5): 596–9. DOI : 10,1001 / archsurg.1970.01340230062016 . ISSN 0004-0010 . PMID 4908950 .
- ^ Белзер Ф.О., Конц С.Л. (1970). «Сохранение и трансплантация почек трупа человека: двухлетний опыт» . Ann Surg . 172 (3): 394–404. DOI : 10.1097 / 00000658-197009000-00009 . PMC 1397323 . PMID 4918001 .
- ^ Хамфрис, Алабама; Russell, R .; Стоддард, LD; Морец, WH (май 1968 г.). «Успешное пятидневное сохранение почек. Перфузия гипотермической разбавленной плазмой». Исследовательская урология . 5 (6): 609–618. ISSN 0021-0005 . PMID 4914852 .
- ^ Коллинз, GM; Браво-Шугарман, Мария; Терасаки, П.И. (декабрь 1969 г.). «Консервация почек для транспортировки». Ланцет . 294 (7632): 1219–1222. DOI : 10.1016 / S0140-6736 (69) 90753-3 . PMID 4187813 .
- ^ Keeler, R .; Swinney, J .; Тейлор, RMR; Улдалл, ПР (декабрь 1966 г.). «Проблема сохранения почек1». Британский журнал урологии . 38 (6): 653–656. DOI : 10.1111 / j.1464-410X.1966.tb09773.x . PMID 5335118 .
- ^ Дафф Р.С., Гинзберг Дж. (1957). «Некоторые периферические сосудистые эффекты внутриартериального дибенилина у человека». Clin Sci . 16 (1): 187–196. PMID 13414151 .
- ^ Ранжел Д.М., Брукнер В.Л., Байфилд Дж. Э., Динбар Дж. Э., Якеиси Ю., Стивенс Г. Х., Фонкалсруд Е. В. (1969). «Ферментативная оценка сохранения печени с использованием стабилизирующих клетки препаратов». Surg Gynecol Obstet . 129 : 963–972.CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
- ^ Лю, Вэнь-Пен; Humphries, ArthurL .; Stoddard, LelandD .; Морец, Уильям Х. (Август 1970 г.). «48-часовое хранение в почках». Ланцет . 296 (7669): 423. DOI : 10.1016 / S0140-6736 (70) 90041-3 . PMID 4194732 .
- ^ Вудс, Джон Э. (1970-11-01). «Проблемы 48-72-часовой сохранности почек собак». Архив хирургии . 101 (5): 605–9. DOI : 10,1001 / archsurg.1970.01340290061013 . ISSN 0004-0010 . PMID 5479705 .
- ^ а б Вудс Дж. Э. (1971). «Успешное трех-семидневное сохранение собачьих почек». Arch Surg . 102 (6): 614–616. DOI : 10,1001 / archsurg.1971.01350060078024 . PMID 4930759 .
- ^ а б Джонсон, RWG; Андерсон, Мэрилин; Флир, CTG; Мюррей, Шейла Г.Х .; Тейлор, RMR; Суинни, Джон (март 1972 г.). «Оценка нового перфузионного раствора для сохранения почек». Трансплантация . 13 (3): 270–275. DOI : 10.1097 / 00007890-197203000-00012 . ISSN 0041-1337 . PMID 4553729 . S2CID 35755493 .
- ^ а б Claes, G .; Aurell, M .; Blohmé, I .; Петтерссон, С. (1972). «Экспериментальные и клинические результаты непрерывной гипотермической перфузии альбумина». Труды Европейской ассоциации диализа и трансплантологии. Европейская ассоциация диализа и трансплантологии . 9 : 484–490. ISSN 0071-2736 . PMID 4589766 .
- ^ Мюррей Р., Дифенбах WCL (1953). «Влияние тепла на возбудителя гомологичного сывороточного гепатита». Proc Soc Exp Biol Med . 84 (1): 230–231. DOI : 10.3181 / 00379727-84-20599 . PMID 13120994 . S2CID 29635377 .
- ^ Хинк, JH; Паппенхаген, .AR; Lundblad, J .; Джонсон, Ф. Ф. (июнь 1970 г.). «Фракция белка плазмы (человека)». Vox Sanguinis . 18 (6): 527–541. DOI : 10.1111 / j.1423-0410.1970.tb02185.x . PMID 4104308 . S2CID 71936479 .
- ^ Хорсбург Т. (1973). «Возможная роль свободных жирных кислот в средах для сохранения почек». Природа Новая Биология . 242 (117): 122–123. DOI : 10.1038 / newbio242122a0 . PMID 4513414 .
- ^ Джонсон RWG. Исследования по сохранению почек. Ньюкасл, Англия: Университет Ньюкасла, 1973, 94 стр. Магистерская диссертация.
- ^ а б в Лю, WP; Хамфрис, Алабама; Russell, R .; Стоддард, LD; Гарсия, Луизиана; Серкес, К.Д. (1973). «Трех- и семидневная перфузия почки собаки фракцией IV-4 белка плазмы крови человека». Хирургический форум . 24 : 316–318. ISSN 0071-8041 . PMID 4806016 .
- ^ Хамфрис, Алабама; Гарсия, Луизиана; Серкес, К.Д. (сентябрь 1974 г.). «Перфузаты для длительного хранения путем непрерывной перфузии». Трансплантация . 6 (3): 249–253. ISSN 0041-1345 . PMID 4606897 .
- ^ Джойс М., Проктор Э. (1974). «Гипотермическая перфузия-сохранение почек собаки в течение 48-72 часов без производных плазмы или мембранной оксигенации». Трансплантация . 18 (6): 548–550. DOI : 10.1097 / 00007890-197412000-00014 . PMID 4612890 .
- ^ Мешки, Стивен А .; Петрич, Питер Х .; Кауфман, Джозеф Дж. (Май 1973 г.). «Сохранение почек собак с помощью нового перфузата». Ланцет . 301 (7811): 1024–1028. DOI : 10.1016 / S0140-6736 (73) 90665-X . PMID 4122110 .
- ^ Ross, H .; Маршалл, Вернон С.; Эскотт, Маргарет Л. (июнь 1976 г.). «72-часовое сохранение почек собак без постоянной перфузии». Трансплантация . 21 (6): 498–501. DOI : 10.1097 / 00007890-197606000-00009 . ISSN 0041-1337 . PMID 936278 . S2CID 29098639 .
- ^ Коллинз GM, Халаш Н.А. (1974). «Упрощенное 72-часовое хранение почек». Хирургический форум . 25 : 275–277. PMID 4612775 .
- ^ Коллинз GM, Халаш Н.А. (1973). «Роль пульсирующего течения в сохранении почек». Трансплантация . 16 (4): 378–379. DOI : 10.1097 / 00007890-197310000-00018 . PMID 4583153 .
- ^ Коллинз GM, Халаш Н.А. (1974). «Упрощенное 72-часовое хранение почек». Хирургический форум . 25 : 275–277. PMID 4612775 .
- ^ Grundmann, R .; Raab, M .; Meusel, E .; Kirchhoff, R .; Пихлмайер, Х. (март 1975 г.). «Анализ оптимального перфузионного давления и скорости потока почечного сосудистого сопротивления и потребления кислорода в гипотермической перфузируемой почке». Хирургия . 77 (3): 451–461. ISSN 0039-6060 . PMID 1092016 .
- ^ Б с д е е г Коэн, Джеффри Леонард (1982). Сохранение почек на 8 дней . copac.jisc.ac.uk (кандидатская диссертация). Ливерпульский университет. OCLC 757144327 . EThOS uk.bl.ethos.535952 . ( требуется регистрация )
- ^ Коэн, ГЛ; Burdett, K .; Джонсон, RWG (декабрь 1985 г.). «Стимуляция потребления кислорода олеиновой и октановой кислотами при гипотермическом сохранении почек». Криобиология . 22 (6): 615–616. DOI : 10.1016 / 0011-2240 (85) 90078-1 .
- Перейти ↑ Mackay B, Moloney PJ, Rix DB. «Использование электронной микроскопии в сохранении почек и перфузии». В: Norman JC, ed. Перфузия и сохранение органов. Нью-Йорк: Appleton Century Crofts, 1968: 697-714.
- ^ а б в Вудс, Дж. Э .; Флейшер, Джорджия; Хирше, Б.Л. (сентябрь 1974 г.). «Пятидневная перфузия почек собак: постулируемый эффект стероидов». Трансплантация . 6 (3): 255–260. ISSN 0041-1345 . PMID 4153357 .
- ^ а б Хилл, GS; Свет, JA; Перлофф, LJ (апрель 1976 г.). «Перфузионное повреждение при трансплантации почки». Хирургия . 79 (4): 440–447. ISSN 0039-6060 . PMID 769223 .
- ^ Кастагир Б.К., Кабб К., Леонардс-младший (1969). «Ультраструктура почки собаки сохраняется в течение 24 часов». Trans Am Soc Artific Intern Organs . 15 : 214–218.CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
- ^ Скотт, Д.Ф .; Морли, Арканзас; Суинни, Дж. (Сентябрь 1969 г.). «Сохранение почек собак после гипотермической перфузии и последующей функции». Британский журнал хирургии . 56 (9): 688–691. DOI : 10.1002 / bjs.1800560913 . PMID 4897217 . S2CID 44273808 .
- ^ Педерсен, Ф. Б.; Гринчук-младший; Scheibel, JH; Соренсен, Б.Л. (январь 1973 г.). «Производство мочи и метаболизм глюкозы и молочной кислоты в почках в течение 36 часов охлаждения и перфузии разбавленной плазмой». Скандинавский журнал урологии и нефрологии . 7 (1): 68–73. DOI : 10.3109 / 00365597309133675 . ISSN 0036-5599 . PMID 4701659 .
- ^ McLoughlin, Gerard A .; Sells, Robert A .; Тиррелл, Ирэн (май 1974 г.). «Оценка методов сохранения почек». Британский журнал хирургии . 61 (5): 406–409. DOI : 10.1002 / bjs.1800610520 . PMID 4598857 . S2CID 3249755 .
- ^ Глинн И.М. (1968). «Мембранная аденозинтрифосфатаза и транспорт катионов». Br Med Bull . 24 (2): 165–169. DOI : 10.1093 / oxfordjournals.bmb.a070620 . PMID 4231272 .
- ^ Леви М.Н. (1959). «Потребление кислорода и кровоток в гипотермической перфузированной почке» . Am J Physiol . 197 (5): 1111–1114. DOI : 10,1152 / ajplegacy.1959.197.5.1111 . PMID 14416432 .
- ^ Мартин, Дэвид Р .; Скотт, Дэвид Ф .; Downes, Glenn L .; Белзер, Фолкерт О. (январь 1972 г.). «Основная причина неудачного сохранения печени и сердца: холодовая чувствительность системы АТФазы» . Анналы хирургии . 175 (1): 111–117. DOI : 10.1097 / 00000658-197201000-00017 . ISSN 0003-4932 . PMC 1355165 . PMID 4258534 .
- ^ Belzer, Folkert O .; Хоффман, Роберт; Хуанг, Жозефина; Доунс, Гленн (октябрь 1972 г.). «Повреждение эндотелия в перфузируемой почке собаки и чувствительность к холоду сосудистой NaK-АТФазы». Криобиология . 9 (5): 457–460. DOI : 10.1016 / 0011-2240 (72) 90163-0 . PMID 4265432 .
- ^ Уиллис Дж. С. (1966). «Характеристики ионного транспорта в коре почек гибернаторов млекопитающих» . J Gen Physiol . 49 (6): 1221–1239. DOI : 10,1085 / jgp.0491221 . PMC 3328324 . PMID 5924109 .
- ^ Франкавилла, Антонио; Браун, Теодор Х .; Фиоре, Роза; Каскардо, Серджио; Тейлор, Пол; Грот, Карл Г. (1973). «Консервация органов для трансплантации с доказательством вредного воздействия быстрого охлаждения». Европейские хирургические исследования . 5 (5): 384–389. DOI : 10.1159 / 000127678 . ISSN 1421-9921 . PMID 4595412 .
- ^ Бергстром Дж, Коллсте Х, Грот С., Халтман Э, Мелин Б. (1971). «Содержание воды, электролитов и метаболизма в корковой ткани почек собаки, сохраненных гипотермией». Proc Eur Dialysis Transplant Ass . 8 : 313–320.CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
- ^ Варник CT, Lazarus HM (1979). «Поддержание уровня адениновых нуклеотидов при хранении почками во внутриклеточных растворах». Proc Soc Exp Biol Med . 160 (4): 453–457. DOI : 10.3181 / 00379727-160-40469 . PMID 450910 . S2CID 29011354 .
- ^ Пегг, Д. Э; Wusteman, MC; Форман, Дж. (Ноябрь 1981 г.). «Метаболизм нормальных и ишемически поврежденных почек кролика во время перфузии в течение 48 часов при 10 ° C». Трансплантация . 32 (5): 437–443. DOI : 10.1097 / 00007890-198111000-00020 . ISSN 0041-1337 . PMID 7330963 .
- ^ Lannon, SG; Тукарам, KT; Оливер, JA; Маккиннон, KJ; Доссетор, Дж. Б. (май 1967 г.). «Сохранность почек по биохимическому показателю». Хирургия, гинекология и акушерство . 124 (5): 999–1004. ISSN 0039-6087 . PMID 5336874 .
- ^ а б в Петтерссон, Сайлас; Клаас, Горан; Шерстен, Тор (1974). «Использование жирных кислот и глюкозы во время непрерывной гипотермической перфузии почки собаки». Европейские хирургические исследования . 6 (2): 79–94. DOI : 10.1159 / 000127708 . ISSN 1421-9921 . PMID 4425410 .
- ^ Ли, Джеймс Б.; Вэнс, Вернон К .; Кэхилл, Джордж Ф. (1962-07-01). «Метаболизм субстратов, меченных С 14, корой и мозговым веществом почек кролика» (PDF) . Американский журнал физиологии. Устаревший контент . 203 (1): 27–36. DOI : 10,1152 / ajplegacy.1962.203.1.27 . ISSN 0002-9513 . PMID 14463505 . S2CID 33890310 . Архивировано из оригинального (PDF) 26 февраля 2019 года.
- ^ Абодели Д.А., Ли Дж. Б. (1971). «Топливо дыхания мозгового вещества почек». Am J Physiol . 220 (6): 1693–1700. DOI : 10,1152 / ajplegacy.1971.220.6.1693 . PMID 4253387 .
- ^ Хорсбург Т. (1973). «Возможная роль свободных жирных кислот в средах для сохранения почек». Природа Новая Биология . 242 (117): 122–123. DOI : 10.1038 / newbio242122a0 . PMID 4513414 .
- ^ Хуанг, JS; Даунс, Г.Л .; Белзер, ФО (сентябрь 1971 г.). «Использование жирных кислот в перфузированной гипотермической почке собаки» . Журнал липидных исследований . 12 (5): 622–627. DOI : 10.1016 / S0022-2275 (20) 39482-7 . ISSN 0022-2275 . PMID 5098398 .
- ^ Хуанг, Жозефина С .; Downes, Glenn L .; Чайлдресс, Гвендолин Л .; Войлок, Джеймс М .; Белзер, Фолкерт О. (октябрь 1974 г.). «Окисление 14C-меченых субстратов корой почек собаки при 10 и 38 ° C». Криобиология . 11 (5): 387–394. DOI : 10.1016 / 0011-2240 (74) 90105-9 . PMID 4452273 .
- ^ Ли К.Й. (1971). «Потеря липидов в пластиковых трубках» . J Lipid Res . 12 (5): 635–636. DOI : 10.1016 / S0022-2275 (20) 39484-0 . PMID 5098400 .
- ^ Абуна, GM; Lim, F .; Кук, JS; Grubb, W .; Крейг, СС; Сейбел, HR; Хьюм, DM (март 1972 г.). «Трехдневная консервация почек собак». Хирургия . 71 (3): 436–444. ISSN 0039-6060 . PMID 4551562 .
- ^ Grundmann, R; Berr, F; Pitschi, H; Кирхгоф, Р.; Pichlmaier, H (март 1974). «Девяносто шесть часов сохранения собачьих почек». Трансплантация . 17 (3): 299–305. DOI : 10.1097 / 00007890-197403000-00010 . ISSN 0041-1337 . PMID 4592185 . S2CID 37365155 .
- ^ Коллинз GM, Халаш Н.А. (1976). «Сорок восемь часов ледового хранения почек. Важность содержания катионов». Хирургия . 79 (4): 432–435. PMID 769222 .
- ^ Пегг, Германия; Фуллер, Би Джей; Foreman, J .; Грин, CJ (декабрь 1972 г.). «Выбор пластиковой трубки для экспериментов с перфузией органов». Криобиология . 9 (6): 569–571. DOI : 10.1016 / 0011-2240 (72) 90182-4 . ISSN 0011-2240 . PMID 4658019 .
- ^ Dvorak, Kenneth J .; Браун, Уильям Э .; Magnusson, Magnus O .; Стоу, Николас Т .; Бановски, Линн HW (февраль 1976 г.). «Влияние высоких доз метилпреднизолона на изолированную перфузированную почку собаки». Трансплантация . 21 (2): 149–157. DOI : 10.1097 / 00007890-197602000-00010 . ISSN 0041-1337 . PMID 1251463 . S2CID 29825354 .
- ^ Варник CT, Lazarus HM (1979). «Поддержание уровня адениновых нуклеотидов при хранении почками во внутриклеточных растворах». Proc Soc Exp Biol Med . 160 (4): 453–457. DOI : 10.3181 / 00379727-160-40469 . PMID 450910 . S2CID 29011354 .
- ^ Lazarus, Harrison M .; Варник, Терри; Хопфенбек, Арлин (апрель 1982 г.). «Разрыв цепи ДНК после хранения в почках». Криобиология . 19 (2): 129–135. DOI : 10.1016 / 0011-2240 (82) 90133-X . PMID 7083879 .
- ^ Лазарус Х.М., Хопфенбек А (1974). «Деградация ДНК при хранении». Experientia . 30 (12): 1410–1411. DOI : 10.1007 / bf01919664 . PMID 4442530 . S2CID 5240888 .
- ^ Sheil, AG Ross; Драммонд, Дж. Малкольм; Булас, Джон (август 1975). «Сосудистый тромбоз в почечных аллотрансплантатах с аппаратной перфузией». Трансплантация . 20 (2): 178–9. DOI : 10.1097 / 00007890-197508000-00016 . ISSN 0041-1337 . PMID 1101485 .
- ^ Кросс, Дональд Э .; Whittier, Frederick C .; Cuppage, Francis E .; Крауч, Томас; Мануэль, Юджин Л .; Грэнтэм, Джаред Дж. (Июнь 1974 г.). «Сверхострое отторжение почечных аллотрансплантатов после пульсирующей перфузии перфузат-содержащим специфическим антителом». Трансплантация . 17 (6): 626–628. DOI : 10.1097 / 00007890-197406000-00013 . ISSN 0041-1337 . PMID 4597928 .
- ^ Лайт, Джимми А .; Эннэйбл, Чарльз; Перлофф, Леонард Дж .; Сулкин, Майкл Д .; Хилл, Гэри С .; Этередж, Эдвард Э .; Спес, Эверетт К. (июнь 1975 г.). «Иммунная травма от сохранения органов». Трансплантация . 19 (6): 511–516. DOI : 10.1097 / 00007890-197506000-00010 . ISSN 0041-1337 . S2CID 45211253 .
- ^ Filo, RS; Диксон, LG; Суба, EA; Продать, кВт (июль 1974 г.). «Иммунологическое повреждение, вызванное перфузией ex vivo аутотрансплантатов почек собак». Хирургия . 76 (1): 88–100. ISSN 0039-6060 . PMID 4601595 .
- ^ Демпстер, Вирджиния; Конц, SL; Йованович, М. (1964-02-15). «Простая методика хранения в почках» . BMJ . 1 (5380): 407–410. DOI : 10.1136 / bmj.1.5380.407 . ISSN 0959-8138 . PMC 1813389 . PMID 14085969 .