Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску

В биохимии , ABTS ( 2,2'-азины-бис (3-этилбензотиазолин-6-сульфоновый кислота) ) представляет собой химическое соединение , используемое для наблюдения за кинетики реакции специфических ферментов . Обычно его используют в иммуноферментном анализе ( ELISA ) для обнаружения связывания молекул друг с другом.

Он обычно используется в качестве субстрата с перекисью водорода для фермента пероксидазы (например, пероксидазы хрена ) или отдельно с ферментами синей мультикоппероксидазы (такими как лакказа или билирубиноксидаза ). Его использование позволяет проследить кинетику реакции самих пероксидаз . Таким образом, его также можно использовать для косвенного отслеживания кинетики реакции любого фермента, продуцирующего перекись водорода , или просто для количественного определения количества перекиси водорода в образце.

Формальные потенциалы восстановления для ABTS достаточно высоки, чтобы он мог действовать как донор электронов для восстановления оксо-частиц, таких как молекулярный кислород и перекись водорода, особенно при менее экстремальных значениях pH, встречающихся в биологическом катализе. В этих условиях сульфонатные группы полностью депротонированы, и медиатор существует в виде дианиона.

ABTS - · + e - → ABTS 2– E ° ′ = 0,67 В против SHE
ABTS + e - → ABTS - · E ° ′ = 1,08 В против SHE [1]

Это соединение выбрано, потому что фермент облегчает реакцию с перекисью водорода, превращая ее в зеленый и растворимый конечный продукт. Его новый максимум поглощения света 420 нм (ε = 3,6 × 10 4 M –1 см –1 ) [2] можно легко проследить с помощью спектрофотометра , обычного лабораторного прибора. Иногда он используется как часть реагента для оценки уровня глюкозы при обнаружении концентраций глюкозы в растворах, таких как сыворотка крови .

ABTS также часто используется исследователями пищевой промышленности и сельского хозяйства для измерения антиоксидантной способности пищевых продуктов. [3] В этом анализе ABTS превращается в свой катион-радикал путем добавления персульфата натрия . Этот катион-радикал имеет синий цвет и поглощает свет с длиной волны 734 нм. [4] ЕБСТ катион - радикал является реакционноспособным по отношению к большинству антиоксидантов , включая фенольные , тиолов и витамина С . [5] Во время этой реакции синий катион-радикал ABTS превращается обратно в свою бесцветную нейтральную форму. За реакцией можно следить спектрофотометрически. Этот анализ часто называютАнализ эквивалентной антиоксидантной способности тролокса (TEAC). Реакционная способность различных антиоксидантов испытанных по сравнению с Trolox , который является водорастворимым аналогом витамина Е . [6]

Приложения для функционального анализа пищи [ править ]

На основании особых химических свойств образующихся свободных радикалов анализ ABTS был использован для определения антиоксидантной способности пищевых продуктов. Например, полифенольные соединения, которые широко распространены во фруктах, могут подавлять свободные радикалы в организме человека, тем самым предотвращая окислительное повреждение свободными радикалами. Антиоксидантная активность растительного экстракта или пищевого продукта была измерена с помощью анализа ABTS. Одним из примеров с подробным описанием метода является анализ антиоксидантной активности продуктов из гибискуса. [7]

Ссылки [ править ]

  1. ^ Бурбонне, Роберт; Пиявка, Дональ; Пейс, Майкл Г. (1998-03-02), "Электрохимический анализ взаимодействий лакказов медиаторов с лигнином модельных соединениями", Biochimica Biophysica Acta , и др (ВВ) - Общие предметы , 1 379 (3): 381-390, DOI : 10.1016 / S0304-4165 (97) 00117-7 , PMID  9545600
  2. Шин, Кван-Су; Ли, Ё-Джин (2000-12-01), «Очистка и характеристика нового члена семейства лакказа из базидиомицета белой гнили Coriolus hirsutus », Архив биохимии и биофизики , 384 (1): 109–115, DOI : 10,1006 / abbi.2000.2083 , PMID 11147821 
  3. ^ Хуанг, Дэцзянь; Оу, Боксин; Прайор, Дональд Л. (25 февраля 2005 г. ), "Химия, лежащая в основе анализа антиоксидантной способности", J. Agric. Food Chem. , 53 (6): 1841-1856, DOI : 10.1021 / jf030723c , PMID 15769103 
  4. Re, Роберта; Пеллегрини, Николетта; Протеггенте, Анна; Паннала, Анант; Райс-Эванс, Екатерина (1999-06-02), "Антиоксидантная активность применяя усовершенствованные ABTS катион - радикал обесцвечивания анализа", Free Radical биологии и медицины , 26 (9-10): 1231-1237, DOI : 10.1016 / S0891-5849 (98) 00315-3 , PMID 10381194 
  5. ^ Уокер, Ричард Б .; Эверетт, Джейс Д. (2009-01-29), "Сравнительная скорость реакции различных антиоксидантов с радикальным катионом ABTS", J. Agric. Food Chem. , 57 (4): 1156-1161, DOI : 10.1021 / jf8026765 , PMID 19199590 
  6. ^ Барклай, LRC; Локк, SJ; MacNeil, JM (1985), "Автоокисление в мицеллах - синергизм витамина C с жирорастворимым витамином E и водорастворимым тролоксом", Can. J. Chem. , 63 (2): 366-374, DOI : 10,1139 / v85-062
  7. ^ Zhen, J .; Виллани, Т.С.; Guo, Y .; Ци, Й .; Чин, К .; Пан, MH; Ву, Q. (2016). «Фитохимия, антиоксидантная способность, общее содержание фенолов и противовоспалительная активность листьев Hibiscus sabdariffa». Пищевая химия . 190 : 673–680. DOI : 10.1016 / j.foodchem.2015.06.006 . PMID 26213025 .