Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску
текст
Фазовое изображение БЭ в суспензионной культуре. Индивидуальные БЭ состоят примерно из 1000 мЭСК.
Эмбриоидное тело, клетки которого дифференцировались в белок с усиленной зеленой флуоресценцией, экспрессирующий спонтанно бьющиеся кардиомиоциты .

Эмбриоидные тельца ( ЭТ ) представляют собой трехмерные агрегаты плюрипотентных стволовых клеток .

EB представляют собой дифференцировку эмбриональных стволовых клеток человека в эмбриональные тельца, нарушающие три эмбриональных зародышевых листка.

Фон [ править ]

Типы плюрипотентных клеток, которые составляют эмбриоидные тельца, включают эмбриональные стволовые клетки (ESC), происходящие из стадии бластоцисты эмбрионов мыши (mESC), [1] [2] приматов [3] и человека (hESC) [4] . Кроме того, EB могут быть сформированы из эмбриональных стволовых клеток, полученных с помощью альтернативных методов, включая перенос ядер соматических клеток [5] [6] [7] или перепрограммирование соматических клеток для получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (iPS). [8] [9] [10] [11] Похож на ESC, культивируемые в монослое.форматах, ESCs внутри эмбриоидных тел претерпевают дифференцировку и спецификацию клеток вдоль трех зародышевых клонов - энтодермы, эктодермы и мезодермы - которые включают все типы соматических клеток. [12] [13]

Однако, в отличие от однослойных культур, сфероидные структуры, которые образуются при агрегировании ESCs, позволяют неадгезивную культуру EB в суспензии, что делает культуры EB по своей природе масштабируемыми, что полезно для подходов к биопроцессингу, в результате чего можно получить большие урожаи клеток для потенциальные клинические применения. [14] Кроме того, хотя EBs в основном демонстрируют гетерогенные паттерны дифференцированных типов клеток, ESCs способны реагировать на сходные сигналы, которые управляют эмбриональным развитием . [15] Следовательно, трехмерная структура, включая создание сложных клеточных адгезий и паракринную передачу сигналов в микроокружении EB, [16]делает возможным дифференциацию и морфогенез, в результате чего образуются микроткани, похожие на структуры нативных тканей. Такие микроткани перспективны для прямого [15] или косвенного [17] [18] восстановления поврежденной или больной ткани в применениях регенеративной медицины, а также для тестирования in vitro в фармацевтической промышленности и в качестве модели эмбрионального развития.

Формирование [ править ]

EB образуются путем гомофильного связывания Ca 2+ -зависимой молекулы адгезии E-cadherin , которая высоко экспрессируется на недифференцированных ESC. [19] [20] [21] При культивировании как единичных клеток в отсутствие факторов, препятствующих дифференцировке, ESC спонтанно агрегируют с образованием EB. [19] [22] [23] [24] Такое спонтанное образование часто достигается в объемных суспензионных культурах, когда чашка покрывается неадгезивными материалами, такими как агар.или гидрофильные полимеры, чтобы способствовать предпочтительной адгезии между отдельными клетками, а не с субстратом для культивирования. Поскольку hESC подвергаются апоптозу при культивировании в виде отдельных клеток, образование EB часто требует использования ингибиторов пути rho-ассоциированной киназы (ROCK), включая небольшие молекулы Y-27632 [25] и 2,4-дизамещенный тиазол (Thiazovivin / Tzv). [26] В качестве альтернативы, чтобы избежать диссоциации на отдельные клетки, EB могут быть сформированы из hESC путем ручного разделения прилипших колоний (или областей колоний) с последующим культивированием в суспензии. Формирование EB в суспензии поддается образованию больших количеств EB, но обеспечивает небольшой контроль над размером получаемых агрегатов, часто приводя к большим EB неправильной формы. В качестве альтернативы, гидродинамические силы, передаваемые в платформы для смешанных культур, увеличивают однородность размеров EB, когда ESC инокулируют в объемных суспензиях. [27]

Образование EB также можно более точно контролировать путем инокуляции клеток с известной плотностью в отдельные капли (10-20 мкл), подвешенные на крышке чашки Петри, известные как висячие капли. [21] Хотя этот метод позволяет контролировать размер EB путем изменения количества клеток на каплю, формирование висящих капель является трудоемким и нелегко поддается масштабированию культур. Кроме того, среда не может быть легко заменена в рамках традиционного формата висящих капель, что требует переноса висящих капель в объемные суспензионные культуры через 2–3 дня образования, в результате чего отдельные EB имеют тенденцию к агломерации. Недавно были разработаны новые технологии, позволяющие обмениваться мультимедийными данными в модифицированном формате висячей капли. [28] Кроме того, были разработаны технологии физического разделения клеток путем принудительной агрегации ESC в отдельных лунках или на адгезивных субстратах [29] [30] [31] [32], что позволяет увеличить пропускную способность и контролировать образование EB. В конечном итоге методы, используемые для формирования EB, могут влиять на гетерогенность популяций EB с точки зрения кинетики агрегации, размера и выхода EB, а также траекторий дифференциации. [31] [33] [34]

Дифференциация внутри EB [ править ]

В контексте протоколов дифференцировки ESC образование EB часто используется как метод инициации спонтанной дифференцировки по трем зародышевым линиям . Дифференцировка EB начинается со спецификации внешних клеток по направлению к фенотипу примитивной энтодермы. [35] [36] Затем клетки снаружи откладывают внеклеточный матрикс (ЕСМ), содержащий коллаген IV и ламинин , [37] [38] аналогично составу и структуре базальной мембраны.. В ответ на отложение ECM EB часто образуют кистозную полость, при этом клетки, контактирующие с базальной мембраной, остаются жизнеспособными, а клетки внутри подвергаются апоптозу, в результате чего образуется заполненная жидкостью полость, окруженная клетками. [39] [40] [41] Последующее дифференцирование приводит к образованию производных от трех зародышевых линий. В отсутствие добавок, «стандартная» дифференцировка ESCs в значительной степени направлена ​​на эктодерму и последующие нейронные клоны . [42] Тем не менее, были разработаны альтернативные композиции сред, включая использование фетальной бычьей сыворотки, а также определенные добавки факторов роста, чтобы способствовать дифференцировке в направлении мезодермы и энтодермы.родословные. [43] [44] [45]

В результате трехмерной структуры EB во время дифференцировки EB происходит сложный морфогенез, включая появление популяций эпителиально- и мезенхимальных клеток, а также появление маркеров, связанных с эпителиально-мезенхимальным переходом (EMT). [46] [47] Кроме того, индуктивные эффекты, возникающие в результате передачи сигналов между клеточными популяциями в EBs, приводят к пространственным и временным изменениям, которые способствуют сложному морфогенезу . [48] Тканеподобные структуры часто проявляются внутри БЭ, включая появление островков крови, напоминающих ранние структуры кровеносных сосудов в развивающемся эмбрионе, а также формирование паттерна нейритов.расширения (свидетельствующие об организации нейронов) и спонтанной сократительной активности (свидетельствующие о дифференцировке кардиомиоцитов ) при нанесении EB на адгезивные субстраты, такие как желатин . [13] Совсем недавно в результате дифференцировки EB были созданы сложные структуры, в том числе структуры, подобные оптическим чашечкам, in vitro. [49]

Параллели с эмбриональным развитием [ править ]

Основная статья: эмбриогенез

Большая часть исследований, имеющих важное значение для дифференцировки и морфогенеза эмбриональных стволовых клеток, происходит из исследований в области биологии развития и эмбриогенеза млекопитающих. [15] Например, сразу после стадии развития бластоцисты (из которой происходят ESC) эмбрион подвергается гаструляции , в результате чего клеточная спецификация внутренней клеточной массы приводит к образованию висцеральной энтодермы и эпибласта . [50] По мере формирования передне-задней оси у эмбриона развивается временная структура, известная как примитивная полоска. [51] Большая часть пространственного паттерна, который происходит во время формирования и миграции примитивной полоски, является результатом секреции агонистов и антагонистов различными популяциями клеток, включая факторы роста из семейств Wnt и трансформирующих факторов роста β (TGFβ) (Lefty 1, Nodal ), а также репрессоры тех же молекул (Dkk-1, Sfrp1, Sfrp5). [52] [53] [54] Из-за сходства между эмбриогенезом и дифференцировкой ESC, многие из тех же факторов роста являются центральными для подходов к направленной дифференцировке.

Кроме того, развитие культуры EB привело к развитию эмбриональных органоидов (гаструлоидов), которые показывают замечательные параллели с эмбриональным развитием [55] [56] [57] [58] [59], такие как нарушение симметрии, локализованная экспрессия брахьюри , формирование осей эмбриона (переднезадний, дорсовентральный и лево-правый) и движения, подобные гаструляции. [55] [56] [57]

Проблемы на пути к дифференциации [ править ]

В отличие от дифференцировки ESCs в однослойных культурах, посредством чего добавление растворимых морфогенов и внеклеточное микроокружение может точно и гомогенно контролироваться, трехмерная структура EBs создает проблемы для направленной дифференцировки. [16] [60] Например, популяция висцеральной энтодермы, которая формирует внешнюю оболочку EB, создает внешнюю «оболочку», состоящую из тесно связанных эпителиоподобных клеток, а также плотного ECM . [61] [62] Из-за таких физических ограничений, в сочетании с размером EB, транспортные ограничения возникают внутри EB, создавая градиенты морфогенов, метаболитов и питательных веществ. [60] Было подсчитано, что транспорт кислорода ограничен в клеточных агрегатах диаметром более 300 мкм; [63] однако на развитие таких градиентов также влияют размер молекул и скорость поглощения клетками. Следовательно, доставка морфогенов к EB приводит к повышенной гетерогенности и снижению эффективности популяций дифференцированных клеток по сравнению с монослойными культурами. Один из методов решения транспортных ограничений внутри EB заключается в полимерной доставке морфогенов изнутри структуры EB. [61] [64] [65] Кроме того, EB можно культивировать как отдельные микроткани и впоследствии собирать в более крупные структуры для применения в тканевой инженерии. [66] Хотя сложность, возникающая из-за трехмерных адгезий и передачи сигналов, может повторять более естественные тканевые структуры [67] [68], это также создает проблемы для понимания относительного вклада механических, химических и физических сигналов в результирующие клеточные фенотипы и морфогенез.

См. Также [ править ]

  • Органоид головного мозга
  • Индуцированные стволовые клетки
  • Плюрипотентность

Ссылки [ править ]

  1. ^ Мартин, GR (1981). «Выделение плюрипотентной клеточной линии из ранних эмбрионов мыши, культивируемых в среде, кондиционированной стволовыми клетками тератокарциномы» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 78 (12): 7634–7638. DOI : 10.1073 / pnas.78.12.7634 . PMC  349323 . PMID  6950406 .
  2. ^ Эванс, MJ; Кауфман, MH (1981). «Создание в культуре плюрипотенциальных клеток из эмбрионов мыши». Природа . 292 (5819): 154–156. DOI : 10.1038 / 292154a0 . PMID 7242681 . 
  3. ^ Томсон, JA; Калишман, Дж .; Голос, ТГ; Дурнинг, М .; Харрис, CP; Беккер, РА; Хирн, JP (1995). «Выделение линии эмбриональных стволовых клеток приматов» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 92 (17): 7844–7848. DOI : 10.1073 / pnas.92.17.7844 . PMC 41242 . PMID 7544005 .  
  4. ^ Томсон, JA; Itskovitz-Eldor, J .; Шапиро, СС; Вакниц, Массачусетс; Swiergiel, JJ; Маршалл, VS; Джонс, JM (1998). «Линии эмбриональных стволовых клеток, полученные из бластоцист человека» . Наука . 282 (5391): 1145–1147. DOI : 10.1126 / science.282.5391.1145 . PMID 9804556 . 
  5. ^ Briggs, R .; Кинг, Т.Дж. (1952). «Трансплантация живых ядер из клеток бластулы в энуклеированные яйца лягушек» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 38 (5): 455–463. DOI : 10.1073 / pnas.38.5.455 . PMC 1063586 . PMID 16589125 .  
  6. ^ Вильмут, И .; Schnieke, AE; McWhir, J .; Добрый, AJ; Кэмпбелл, KHS (1997). «Жизнеспособное потомство, полученное из клеток плода и взрослых млекопитающих». Природа . 385 (6619): 810–813. DOI : 10.1038 / 385810a0 . PMID 9039911 . 
  7. ^ Манси, MJ; Михальская, А.Е .; О'Брайен, CM; Траунсон, АО; Пера, М.Ф .; Маунтфорд, PS (2000). «Выделение плюрипотентных эмбриональных стволовых клеток из перепрограммированных ядер соматических клеток взрослых мышей». Текущая биология . 10 (16): 989–992. DOI : 10.1016 / s0960-9822 (00) 00648-5 . PMID 10985386 . 
  8. ^ Takahashi, K .; Яманака, С. (2006). «Индукция плюрипотентных стволовых клеток из эмбриональных и взрослых культур фибробластов мыши с помощью определенных факторов». Cell . 126 (4): 663–76. DOI : 10.1016 / j.cell.2006.07.024 . hdl : 2433/159777 . PMID 16904174 . 
  9. ^ Takahashi, K .; Tanabe, K .; Охнуки, М .; Нарита, М .; Ichisaka, T .; Tomoda, K .; Яманака, С. (2007). «Индукция плюрипотентных стволовых клеток из фибробластов взрослого человека с помощью определенных факторов». Cell . 131 (5): 861–872. DOI : 10.1016 / j.cell.2007.11.019 . hdl : 2433/49782 . PMID 18035408 . 
  10. ^ Yu, J .; Водяник, М.А. Smuga-Otto, K .; Antosiewicz-Bourget, J .; Frane, JL; Tian, ​​S .; Nie, J .; Jonsdottir, GA; Ruotti, V .; Стюарт, Р .; Слуквин, II; Томсон, Дж. А. (2007). «Индуцированные линии плюрипотентных стволовых клеток, полученные из соматических клеток человека». Наука . 318 (5858): 1917–1920. DOI : 10.1126 / science.1151526 . PMID 18029452 . 
  11. ^ Парк, штат Айленд; Arora, N .; Huo, H .; Maherali, N .; Ahfeldt, T .; Shimamura, A .; Ленш, МВт; Cowan, C .; Hochedlinger, K .; Дейли, GQ (2008). «Плюрипотентные стволовые клетки, индуцированные конкретным заболеванием» . Cell . 134 (5): 877–886. DOI : 10.1016 / j.cell.2008.07.041 . PMC 2633781 . PMID 18691744 .  
  12. ^ Itskovitz-Eldor, J .; Schuldiner, M .; Karsenti, D .; Eden, A .; Yanuka, O .; Amit, M .; Soreq, H .; Бенвенисти, Н. (2000). «Дифференциация человеческих эмбриональных стволовых клеток в эмбриональные тела, нарушающие три эмбриональных зародышевых листка» . Молекулярная медицина (Кембридж, Массачусетс) . 6 (2): 88–95. PMC 1949933 . PMID 10859025 .  
  13. ^ a b Doetschman, TC; Eistetter, H .; Кац, М .; Schmidt, W .; Кемлер Р. (1985). «Развитие in vitro линий эмбриональных стволовых клеток, полученных из бластоцист: формирование висцерального желточного мешка, островков крови и миокарда». Журнал эмбриологии и экспериментальной морфологии . 87 : 27–45. PMID 3897439 . 
  14. ^ Данг, SM; Gerecht-Nir, S .; Chen, J .; Itskovitz-Eldor, J .; Зандстра, PW (2004). «Контролируемая масштабируемая культура дифференцировки эмбриональных стволовых клеток» . Стволовые клетки . 22 (3): 275–282. DOI : 10.1634 / стволовые клетки.22-3-275 . PMID 15153605 . 
  15. ^ a b c Мерри, CE; Келлер, Г. (2008). «Дифференциация эмбриональных стволовых клеток для клинически значимых популяций: уроки эмбрионального развития». Cell . 132 (4): 661–680. DOI : 10.1016 / j.cell.2008.02.008 . PMID 18295582 . 
  16. ^ a b Bratt-Leal, ASM; Карпенедо, Р.Л .; Макдевитт, TC (2009). «Инженерия микроокружения эмбриоидного тела для прямой дифференцировки эмбриональных стволовых клеток» . Прогресс биотехнологии . 25 (1): 43–51. DOI : 10.1002 / btpr.139 . PMC 2693014 . PMID 19198003 .  
  17. ^ Наир, Р .; Шукла, С .; Макдевитт, TC (2008). «Бесклеточные матрицы, полученные из дифференцирующихся эмбриональных стволовых клеток». Журнал биомедицинского исследования материалов Часть A . 87A (4): 1075–1085. DOI : 10.1002 / jbm.a.31851 . PMID 18260134 . 
  18. ^ Бараняк, PR; Макдевитт, TC (2010). «Паракринные действия стволовых клеток и регенерация тканей» . Регенеративная медицина . 5 (1): 121–143. DOI : 10.2217 / rme.09.74 . PMC 2833273 . PMID 20017699 .  
  19. ^ a b Куросава, Х. (2007). «Методы индукции образования эмбриоидных тел: система дифференцировки эмбриональных стволовых клеток in vitro». Журнал биологии и биоинженерии . 103 (5): 389–398. DOI : 10,1263 / jbb.103.389 . PMID 17609152 . 
  20. ^ Larue, L .; Antos, C .; Butz, S .; Huber, O .; Delmas, V .; Dominis, M .; Кемлер Р. (1996). «Роль кадгеринов в формировании тканей». Развитие . 122 (10): 3185–3194. PMID 8898231 . 
  21. ^ а б Юн, BS; Ю, SJ; Ли, Дж. Э .; Вы, С .; Ли, HT; Юн, HS (2006). «Повышенная дифференциация эмбриональных стволовых клеток человека в кардиомиоциты путем комбинирования культуры висячей капли и лечения 5-азацитидином». Дифференциация . 74 (4): 149–159. DOI : 10.1111 / j.1432-0436.2006.00063.x . PMID 16683985 . 
  22. ^ Парк, JH; Kim, SJ; Ой, ЭДжей; Луна, SY; Roh, SI; Ким, CG; Юн, HS (2003). «Создание и поддержание человеческих эмбриональных стволовых клеток на STO, постоянно растущей клеточной линии» . Биология размножения . 69 (6): 2007–2014. DOI : 10.1095 / biolreprod.103.017467 . PMID 12930726 . 
  23. ^ Уильямс, RL; Хилтон, диджей; Pease, S .; Уилсон, TA; Стюарт, К.Л .; Зубчатая передача, DP; Вагнер, Э.Ф .; Metcalf, D .; Nicola, NA; Гоф, Н.М. (1988). «Фактор ингибирования миелоидного лейкоза поддерживает потенциал развития эмбриональных стволовых клеток». Природа . 336 (6200): 684–687. DOI : 10.1038 / 336684a0 . PMID 3143916 . 
  24. ^ Людвиг, TE; Левенштейн, Мэн; Джонс, JM; Берггрен, WT; Mitchen, ER; Frane, JL; Crandall, LJ; Дэйг, Калифорния; Конард, КР; Piekarczyk, MS; Лланас, РА; Томсон, Дж. А. (2006). «Получение эмбриональных стволовых клеток человека в определенных условиях». Природа Биотехнологии . 24 (2): 185–187. DOI : 10.1038 / nbt1177 . PMID 16388305 . 
  25. ^ Ватанабэ, К .; Ueno, M .; Kamiya, D .; Нишияма, А .; Matsumura, M .; Wataya, T .; Такахаши, JB; Nishikawa, S .; Nishikawa, SI; Muguruma, K .; Сасай, Ю. (2007). «Ингибитор ROCK обеспечивает выживание диссоциированных эмбриональных стволовых клеток человека». Природа Биотехнологии . 25 (6): 681–686. DOI : 10.1038 / nbt1310 . PMID 17529971 . 
  26. ^ Xu, Y .; Чжу, X .; Хам, HS; Wei, W .; Hao, E .; Хайек, А .; Дин, С. (2010). «Выявление основного механизма регуляции передачи сигналов для выживания плюрипотентных стволовых клеток и самообновления с помощью малых молекул» . Труды Национальной академии наук . 107 (18): 8129–8134. DOI : 10.1073 / pnas.1002024107 . PMC 2889586 . PMID 20406903 .  
  27. ^ Карпенедо, RL; Сарджент, CY; Макдевитт, TC (2007). «Ротационная суспензионная культура повышает эффективность, урожайность и однородность дифференциации эмбриоидных тел». Стволовые клетки . 25 (9): 2224–2234. DOI : 10.1634 / стволовые клетки.2006-0523 . PMID 17585171 . 
  28. ^ Тунг, YC; Сяо, AY; Allen, SG; Torisawa, YS; Хо, М .; Такаяма, С. (2011). «Высокопроизводительная трехмерная культура сфероидов и тестирование лекарств с использованием массива 384 висящих капель» . Аналитик . 136 (3): 473–478. DOI : 10.1039 / c0an00609b . PMC 7454010 . PMID 20967331 . S2CID 35415772 .   
  29. ^ Парк, J .; Cho, CH; Parashurama, N .; Li, Y .; Berthiaume, FO; Тонер, М .; Тиллес, AW; Ярмуш, МЛ (2007). «Модуляция дифференцировки эмбриональных стволовых клеток на основе микротехнологий» . Лаборатория на чипе . 7 (8): 1018–1028. DOI : 10.1039 / b704739h . PMID 17653344 . 
  30. ^ Мор, JC; Де Пабло, Джей Джей; Палецек, СП (2006). «Трехмерная микропланшетная культура эмбриональных стволовых клеток человека». Биоматериалы . 27 (36): 6032–6042. DOI : 10.1016 / j.biomaterials.2006.07.012 . PMID 16884768 . 
  31. ^ a b Hwang, Y. -S .; Chung, BG; Ортманн, Д .; Hattori, N .; Moeller, H. -C .; Хадемхоссейни, А. (2009). «Микро-опосредованный контроль размера эмбриоидного тела регулирует судьбу эмбриональных стволовых клеток посредством дифференциальной экспрессии WNT5a и WNT11» . Труды Национальной академии наук . 106 (40): 16978–16983. DOI : 10.1073 / pnas.0905550106 . PMC 2761314 . PMID 19805103 .  
  32. ^ Ungrin, MD; Joshi, C .; Nica, A .; Bauwens, CL; Зандстра, PW (2008). Каллертс, Патрик (ред.). «Воспроизводимое сверхвысокопроизводительное формирование многоклеточной организации из агрегатов человеческих эмбриональных стволовых клеток, полученных из суспензии единичных клеток» . PLOS ONE . 3 (2): e1565. DOI : 10.1371 / journal.pone.0001565 . PMC 2215775 . PMID 18270562 .  
  33. ^ Сарджент, CY; Berguig, GY; Макдевитт, TC (2009). «Кардиомиогенная дифференцировка эмбриоидных тел стимулируется вращающейся орбитальной суспензионной культурой». Tissue Engineering Часть A . 15 (2): 331–342. DOI : 10.1089 / ten.tea.2008.0145 . PMID 19193130 . 
  34. ^ Баувенс, CLL; Peerani, R .; Niebruegge, S .; Woodhouse, KA; Кумачева, Е .; Husain, M .; Зандстра, PW (2008). "Контроль колоний человеческих эмбриональных стволовых клеток и неоднородность совокупного размера влияет на траектории дифференциации" . Стволовые клетки . 26 (9): 2300–2310. DOI : 10.1634 / стволовые клетки.2008-0183 . PMID 18583540 . 
  35. ^ Chen, Y .; Li, X .; Эшваракумар, вице-президент; Seger, R .; Лонаи, П. (2000). «Передача сигналов фактора роста фибробластов (FGF) через PI 3-киназу и Akt / PKB необходима для дифференцировки эмбриоидных тел» . Онкоген . 19 (33): 3750–3756. DOI : 10.1038 / sj.onc.1203726 . PMID 10949929 . 
  36. ^ Эснер, М .; Pachernik, J .; Hampl, A .; Дворжак, П. (2002). «Целенаправленное разрушение рецептора фактора роста фибробластов-1 блокирует созревание висцеральной энтодермы и кавитацию в эмбриоидных телах мышей». Международный журнал биологии развития . 46 (6): 817–825. PMID 12382948 . 
  37. ^ Ван, YJ; Wu, TC; Чанг, AE; Дамжанов, И. (1984). «Моноклональные антитела к ламинину выявляют гетерогенность базальных мембран в тканях развивающихся и взрослых мышей» . Журнал клеточной биологии . 98 (3): 971–979. DOI : 10,1083 / jcb.98.3.971 . PMC 2113154 . PMID 6365932 .  
  38. ^ Ли, X .; Chen, Y .; Schéele, S .; Arman, E .; Haffner-Krausz, R .; Экблом, П .; Лонаи, П. (2001). «Передача сигналов фактора роста фибробластов и сборка базальной мембраны связаны во время эпителиального морфогенеза эмбриоидного тела» . Журнал клеточной биологии . 153 (4): 811–822. DOI : 10.1083 / jcb.153.4.811 . PMC 2192393 . PMID 11352941 .  
  39. ^ Coucouvanis, E .; Мартин, Г. Р. (1995). «Сигналы на смерть и выживание: двухступенчатый механизм кавитации в эмбрионе позвоночных». Cell . 83 (2): 279–287. DOI : 10.1016 / 0092-8674 (95) 90169-8 . PMID 7585945 . 
  40. ^ Смит, N .; Ватансевер, HS; Murray, P .; Мейер, М .; Frie, C .; Paulsson, M .; Эдгар, Д. (1999). «Отсутствие базальных мембран после нацеливания на ген LAMC1 приводит к эмбриональной летальности из-за нарушения дифференцировки энтодермы» . Журнал клеточной биологии . 144 (1): 151–160. DOI : 10.1083 / jcb.144.1.151 . PMC 2148127 . PMID 9885251 .  
  41. ^ Мюррей, P .; Эдгар, Д. (2000). «Регулирование запрограммированной гибели клеток базальными мембранами в эмбриональном развитии» . Журнал клеточной биологии . 150 (5): 1215–1221. DOI : 10,1083 / jcb.150.5.1215 . PMC 2175256 . PMID 10974008 .  
  42. ^ Инь, QL; Смит, AG (2003). Определенные условия для нейронной приверженности и дифференциации . Методы в энзимологии . 365 . С. 327–341. DOI : 10.1016 / s0076-6879 (03) 65023-8 . ISBN 9780121822682. PMID  14696356 .
  43. ^ Уайлс, М. В.; Келлер, Г. (1991). «Множественные гемопоэтические клоны развиваются из эмбриональных стволовых (ES) клеток в культуре». Развитие . 111 (2): 259–267. PMID 1893864 . 
  44. ^ Purpura, KA; Morin, J .; Зандстра, PW (2008). «Анализ временных и зависимых от концентрации эффектов BMP-4, VEGF и TPO на развитие мезодермы и клеток-предшественников эмбриональных стволовых клеток в определенной бессывороточной среде». Экспериментальная гематология . 36 (9): 1186–1198. DOI : 10.1016 / j.exphem.2008.04.003 . PMID 18550259 . 
  45. ^ Ностро, MC; Cheng, X .; Келлер, GM; Гадью, П. (2008). «Передача сигналов Wnt, Activin и BMP регулирует различные стадии пути развития от эмбриональных стволовых клеток до крови» . Стволовая клетка . 2 (1): 60–71. DOI : 10.1016 / j.stem.2007.10.011 . PMC 2533280 . PMID 18371422 .  
  46. ^ Ten Berge, D .; Koole, W .; Fuerer, C .; Fish, M .; Eroglu, E .; Нуссе, Р. (2008). «Передача сигналов Wnt опосредует самоорганизацию и формирование оси в эмбриоидных телах» . Стволовая клетка . 3 (5): 508–518. DOI : 10.1016 / j.stem.2008.09.013 . PMC 2683270 . PMID 18983966 .  
  47. ^ Шукла, С .; Nair, R .; Ролл, МВт; Браун, КР; Чан, СК; Джонсон, штат Пенсильвания; Уайт, Теннесси; Макдевитт, TC (2009). «Синтез и организация гиалуронана и версикана эмбриональными стволовыми клетками, подвергающимися дифференцировке эмбриоидных тел» . Журнал гистохимии и цитохимии . 58 (4): 345–358. DOI : 10,1369 / jhc.2009.954826 . PMC 2842597 . PMID 20026669 .  
  48. ^ Баувенс, CL; Песня, H .; Thavandiran, N .; Унгрин, М .; Massé, SP; Nanthakumar, K .; Seguin, C .; Зандстра, PW (2011). «Геометрический контроль кардиомиогенной индукции в плюрипотентных стволовых клетках человека». Tissue Engineering Часть A . 17 (15–16): 1901–1909. DOI : 10,1089 / ten.TEA.2010.0563 . PMID 21417693 . S2CID 22010083 .  
  49. ^ Eiraku, M .; Takata, N .; Ishibashi, H .; Kawada, M .; Sakakura, E .; Окуда, С .; Сэкигучи, К .; Adachi, T .; Сасай, Ю. (2011). «Самоорганизующийся морфогенез глазного яблока в трехмерной культуре». Природа . 472 (7341): 51–56. DOI : 10,1038 / природа09941 . PMID 21475194 . 
  50. ^ Bielinska, M .; Narita, N .; Уилсон, ДБ (1999). «Отличительные роли висцеральной энтодермы во время эмбрионального развития мыши». Международный журнал биологии развития . 43 (3): 183–205. PMID 10410899 . 
  51. ^ Бурдсал, Калифорния; Дамский, СН; Педерсен, Р.А. (1993). «Роль E-кадгерина и интегринов в дифференцировке и миграции мезодермы в примитивной полоске млекопитающих». Развитие . 118 (3): 829–844. PMID 7521282 . 
  52. ^ Финли, KR; Tennessen, J .; Шавлот, В. (2003). «Ген белка 5, секретируемого мышиной, экспрессируется в передней висцеральной энтодерме и энтодерме передней кишки во время раннего постимплантационного развития». Паттерны экспрессии генов . 3 (5): 681–684. DOI : 10.1016 / s1567-133x (03) 00091-7 . PMID 12972006 . 
  53. ^ Кемп, C .; Willems, E .; Abdo, S .; Ламбив, Л .; Лейнс, Л. (2005). «Экспрессия всех генов Wnt и их секретируемых антагонистов во время развития бластоцисты у мышей и после имплантации». Динамика развития . 233 (3): 1064–1075. DOI : 10.1002 / dvdy.20408 . PMID 15880404 . 
  54. ^ Ривера-Перес, JA; Магнусон, Т. (2005). «Формированию примитивных полосок у мышей предшествует локальная активация Brachyury и Wnt3». Биология развития . 288 (2): 363–371. DOI : 10.1016 / j.ydbio.2005.09.012 . PMID 16289026 . 
  55. ^ а б Тернер, Дэвид; Алонсо-Кризостомо, Луз; Гиргин, Мехмет; Бэйли-Джонсон, Питер; Glodowski, Cherise R .; Хейворд, Пенелопа С .; Коллиньон, Жером; Густавсен, Карстен; Серуп, Палле (31 января 2017 г.). «Гаструлоиды развивают три оси тела в отсутствие внеэмбриональных тканей и пространственно локализованной передачи сигналов». bioRxiv 10.1101 / 104539 . 
  56. ^ а б Тернер, Дэвид Эндрю; Glodowski, Cherise R .; Луз, Алонсо-Кризостомо; Бэйли-Джонсон, Питер; Hayward, Penny C .; Коллиньон, Жером; Густавсен, Карстен; Serup, Palle; Шретер, Кристиан (13 мая 2016 г.). «Взаимодействия между Nodal и Wnt, сигнализирующими о нарушении устойчивой симметрии и осевой организации в гаструлоидах (эмбриональные органоиды)». bioRxiv 10.1101 / 051722 . 
  57. ^ a b Бэйли-Джонсон, Питер; Бринк, Сюзанна Карина ван ден; Балайо, Тина; Тернер, Дэвид Эндрю; Ариас, Альфонсо Мартинес (24 ноября 2015 г.). «Создание агрегатов эмбриональных стволовых клеток мыши, которые демонстрируют нарушение симметрии, поляризацию и возникающее коллективное поведение in vitro » . Журнал визуализированных экспериментов (105). DOI : 10.3791 / 53252 . ISSN 1940-087X . PMC 4692741 . PMID 26650833 .   
  58. ^ Бринк, Сюзанна К. ван ден; Бэйли-Джонсон, Питер; Балайо, Тина; Хаджантонакис, Анна-Катерина; Новочин, Соня; Тернер, Дэвид А .; Ариас, Альфонсо Мартинес (2014-11-15). «Нарушение симметрии, спецификация зародышевого листка и осевая организация в агрегатах эмбриональных стволовых клеток мыши» . Развитие . 141 (22): 4231–4242. DOI : 10.1242 / dev.113001 . ISSN 0950-1991 . PMC 4302915 . PMID 25371360 .   
  59. ^ Тернер, Дэвид А .; Хейворд, Пенелопа С .; Бэйли-Джонсон, Питер; Руэ, По; Брум, Ребекка; Фавны, Фернандо; Ариас, Альфонсо Мартинес (2014-11-15). «Передача сигналов Wnt / β-катенина и FGF направляет спецификацию и поддержание нейромезодермального аксиального предшественника в ансамблях эмбриональных стволовых клеток мыши» . Развитие . 141 (22): 4243–4253. DOI : 10.1242 / dev.112979 . ISSN 0950-1991 . PMC 4302903 . PMID 25371361 .   
  60. ^ а б Кинни, Массачусетс; Сарджент, CY; Макдевитт, TC (2011). «Многопараметрические эффекты гидродинамической среды на культуру стволовых клеток» . Тканевая инженерия, часть B: обзоры . 17 (4): 249–262. DOI : 10,1089 / ten.TEB.2011.0040 . PMC 3142632 . PMID 21491967 .  
  61. ^ a b Карпенедо, RL; Братт-Лил, ASM; Марклэйн, РА; Seaman, SA; Боуэн, штат Нью-Джерси; Макдональд, JF; Макдевитт, TC (2009). «Гомогенная и организованная дифференциация внутри эмбриоидных тел, индуцированная микросферой доставки малых молекул» . Биоматериалы . 30 (13): 2507–2515. DOI : 10.1016 / j.biomaterials.2009.01.007 . PMC 2921510 . PMID 19162317 .  
  62. ^ Sachlos, E .; Огюст, Д.Т. (2008). «Морфология эмбриоидного тела влияет на диффузионный транспорт индуктивных биохимических веществ: стратегия дифференцировки стволовых клеток». Биоматериалы . 29 (34): 4471–4480. DOI : 10.1016 / j.biomaterials.2008.08.012 . PMID 18793799 . 
  63. ^ Ван Винкль, AP; Ворота, удостоверение личности; Каллос, MS (2012). «Ограничения массопереноса в эмбриоидных телах во время дифференцировки человеческих эмбриональных стволовых клеток». Клетки Тканевые Органы . 196 (1): 34–47. DOI : 10.1159 / 000330691 . PMID 22249133 . 
  64. ^ Братт-Лил, ASM; Карпенедо, Р.Л .; Унгрин, доктор медицины; Зандстра, П. В.; Макдевитт, TC (2011). «Включение биоматериалов в многоклеточные агрегаты модулирует дифференцировку плюрипотентных стволовых клеток» . Биоматериалы . 32 (1): 48–56. DOI : 10.1016 / j.biomaterials.2010.08.113 . PMC 2987521 . PMID 20864164 .  
  65. ^ Purpura, KA; Братт-Лил, ASM; Хаммерсмит, штат Калифорния; Макдевитт, ТС; Зандстра, PW (2012). «Систематическая инженерия трехмерных ниш плюрипотентных стволовых клеток для управления развитием крови» . Биоматериалы . 33 (5): 1271–1280. DOI : 10.1016 / j.biomaterials.2011.10.051 . PMC 4280365 . PMID 22079776 .  
  66. ^ Братт-Лил, ASM; Kepple, KL; Карпенедо, Р.Л .; Кук, штат Монтана; Макдевитт, TC (2011). «Магнитная манипуляция и формирование пространственного паттерна агрегатов многоклеточных стволовых клеток» . Интегративная биология . 3 (12): 1224–1232. DOI : 10.1039 / c1ib00064k . PMC 4633527 . PMID 22076329 .  
  67. ^ Акинс, RE; Rockwood, D .; Робинсон, КГ; Сандаски, Д .; Rabolt, J .; Писарро, К. (2010). «Трехмерная культура изменяет первичный фенотип сердечных клеток» . Tissue Engineering Часть A . 16 (2): 629–641. DOI : 10.1089 / ten.tea.2009.0458 . PMC 2813151 . PMID 20001738 .  
  68. ^ Чанг, TT; Хьюз-Фулфорд, М. (2009). «Монослойные и сфероидные культуры клеток линии клеток гепатоцеллюлярной карциномы печени человека демонстрируют отчетливые глобальные паттерны экспрессии генов и функциональные фенотипы» . Tissue Engineering Часть A . 15 (3): 559–567. DOI : 10.1089 / ten.tea.2007.0434 . PMC 6468949 . PMID 18724832 .