Из Википедии, свободной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску
Тесты на обнаружение антигена малярии
Диагностический Медицинский Щуп.png
Принципиальная схема щупа
Цельдиагностика малярии ...

Малярия тесты для выявления антигенов представляют собой группу коммерчески доступных диагностических экспресс - тестов в экспресс - тестов типа , которые позволяют быстро диагноз по малярии людей , которые иначе не квалифицированных в традиционных лабораторных методов для диагностики малярии или в ситуациях , когда такое оборудование не доступно. В настоящее время коммерчески доступно более 20 таких тестов (тестирование продуктов ВОЗ, 2008 г.). Первым антигеном малярии, подходящим в качестве мишени для такого теста, был растворимый гликолитический фермент глутаматдегидрогеназа . [1] [2] [3] Ни один из быстрых тестов в настоящее время не так чувствителен, как толстыймазок крови , ни как дешево. Основным недостатком использования всех существующих методов щупа является то, что результат в основном качественный. Однако во многих эндемичных районах тропической Африки количественная оценка паразитемии важна, поскольку большой процент населения дает положительный результат при любом качественном анализе.

Экспресс-тесты для диагностики малярии на основе антигенов [ править ]

Малярия - это излечимое заболевание, если у пациентов есть доступ к ранней диагностике и своевременному лечению . Экспресс- тесты (БДТ) на основе антигенов играют важную роль на периферии возможностей служб здравоохранения, поскольку многие сельские клиники не имеют возможности диагностировать малярию на месте из-за отсутствия микроскопов и обученных техников для оценки мазков крови. Кроме того, в регионах, где болезнь не является эндемической , лабораторные технологи имеют очень ограниченный опыт в обнаружении и идентификации паразитов малярии. Ежегодно все большее количество путешественников из регионов с умеренным климатом посещают тропические страны.и многие из них возвращаются с малярией. Тесты RDT по-прежнему считаются дополнением к обычной микроскопии, но с некоторыми улучшениями они вполне могут заменить микроскоп . Тесты просты, и процедуру можно проводить на месте в полевых условиях. В этих тестах используется кровь из пальца или венозная кровь , полный анализ занимает в общей сложности 15–20 минут, и лаборатория не требуется. Порог обнаружения с помощью этих экспресс-диагностических тестов находится в диапазоне 100 паразитов / мкл крови по сравнению с 5 при толстопленочной микроскопии. [4] [5] [6]

pGluDH [ править ]

Плазмодий Глутамат - дегидрогеназа (pGluDH) осаждают принимающих антител [1]

Точный диагноз становится все более и более важным в связи с растущей резистентностью Plasmodium falciparum и высокой ценой на альтернативы хлорохину . Фермент pGluDH не встречается в эритроцитах хозяина и был рекомендован в качестве фермента-маркера для видов Plasmodium Picard-Maureau et al. в 1975 году. [7] Ферментный тест-маркер малярии подходит для повседневной работы и в настоящее время является стандартным тестом в большинстве департаментов, занимающихся малярией. Известно, что присутствие pGluDH отражает жизнеспособность паразита [2]и быстрый диагностический тест с использованием pGluDH в качестве антигена позволит отличать живые организмы от мертвых. Полная БДТ с pGluDH в качестве антигена была разработана в Китае и сейчас проходит клинические испытания . [3] GluDH - это повсеместно распространенные ферменты, которые занимают важную точку разветвления между углеродным и азотным метаболизмом. Как никотинамидадениндинуклеотид (NAD) [EC 1.4.1.2], так и никотинамидадениндинуклеотидфосфат (NADP) зависимые ферменты GluDH [EC 1.4.1.4] присутствуют в плазмодиях.; НАД-зависимый GluDH относительно нестабилен и бесполезен для диагностических целей. Глутаматдегидрогеназа обеспечивает окисляемый источник углерода, используемый для производства энергии, а также восстановленный переносчик электронов, НАДН. Глутамат является основным донором аминокислот для других аминокислот в последующих реакциях трансаминирования. Многочисленные роли глутамата в балансе азота делают его воротами между свободным аммиаком и аминогруппами большинства аминокислот. Опубликована его кристаллическая структура . [8] Активность GluDH у P.vivax , P.ovale и P. malariae.никогда не тестировался, но, учитывая важность GluDH как фермента точки ветвления, каждая клетка должна иметь высокую концентрацию GluDH. Хорошо известно, что ферменты с высокой молекулярной массой (например, GluDH) имеют много изоферментов , что позволяет дифференцировать штаммы (при условии правильного моноклонального антитела ). Хозяин продуцирует антитела против паразитарного фермента, что указывает на низкую идентичность последовательности. [1]

Богатый гистидином протеин II [ править ]

Богатый гистидином белок II (HRP II) представляет собой богатый гистидином и аланином водорастворимый белок, который локализован в нескольких компартментах клетки, включая цитоплазму паразита. Антиген экспрессируется только трофозоитами P. falciparum . [9] [10] ПХ II от P. малярийного участвует в biocrystallization из hemozoin , инертной, кристаллической формы феррипротопорфирин IX (Fe (3 +) - PPIX) производства паразита. Значительное количество HRP II секретируется паразитом в кровоток хозяина и антиген может быть обнаружен в эритроцитах , в сыворотке ,плазма , спинномозговая жидкость и даже моча как секретируемый водорастворимый белок. [11] Эти антигены сохраняются в циркулирующей крови после того, как паразитемия исчезла или значительно уменьшилась. Обычно для того, чтобы результаты тестов на HRP2 становились отрицательными, после успешного лечения требуется около двух недель, но может пройти и месяц, что снижает их ценность для выявления активной инфекции. [12] Ложные положительные результаты были сообщены щуп у пациентов с ревматоидным-фактор-положительным ревматоидным артритом . [9] Поскольку HRP-2 экспрессируется только P. falciparum , эти тесты дадут отрицательные результаты с образцами, содержащими толькоP. vivax , P. ovale или P. malariae ; поэтому многие случаи малярии, не связанной с falciparum, могут быть ошибочно диагностированы как малярийно-отрицательные (некоторые штаммы P.falciparum также не имеют HRP II). Вариабельность результатов ДЭТ на основе pHRP2 связана с вариабельностью целевого антигена. [13]

pLDH [ править ]

Сравнение антител к малярии лактатдегидрогеназы плазмодия (PLDH)

П. фальципарум лактатдегидрогеназы (PfLDH) представляет собой 33 кДа оксидоредуктаз [ЕС 1.1.1.27]. [14] Это последний фермент гликолитического пути, необходимый для выработки АТФ, и один из наиболее распространенных ферментов, экспрессируемых P. falciparum . [15] плазмодий ЛДГ (pLDH) от P. трехдневный , P. malariae , и П. овального ) демонстрирует 90-92% идентичности с PfLDH от P. фальципарума . [16] Было замечено, что уровни pLDH в крови снижаются раньше после лечения, чем HRP2. [17]В этом отношении pLDH похожа на pGluDH. Тем не менее, кинетические свойства и чувствительность к ингибиторам, нацеленным на сайт связывания кофактора, значительно различаются и могут быть идентифицированы путем измерения констант диссоциации для ингибиторов, которые различаются до 21 раза. [18]

pAldo [ править ]

Фруктозо-бисфосфатальдолаза [EC 4.1.2.13] катализирует ключевую реакцию в гликолизе и производстве энергии и вырабатывается всеми четырьмя видами. [19] P.falciparum альдолазы представляет собой белок 41 кДа и имеет 61-68% сходство последовательности с известными эукариотических альдолазами. [20] Его кристаллическая структура была опубликована. [21] Присутствие антител против p41 в сыворотке взрослых людей, частично невосприимчивых к малярии, предполагает, что p41 участвует в защитном иммунном ответе против паразита. [22]

См. Также [ править ]

  • Романовский морилка

Ссылки [ править ]

  1. ^ a b c Ling IT .; Cooksley S .; Bates PA .; Hempelmann E .; Уилсон Р.Дж. (1986). «Антитела к глутаматдегидрогеназе Plasmodium falciparum» (PDF) . Паразитология . 92 (2): 313–324. DOI : 10.1017 / S0031182000064088 . PMID  3086819 .
  2. ^ a b Родригес-Акоста А., Домингес Н.Г., Агилар I, Хирон М.Э. (1998). «Характеристика антигена, растворимого в глутаматдегидрогеназе Plasmodium falciparum» . Braz J Med Biol Res . 31 (9): 1149–1155. DOI : 10.1590 / S0100-879X1998000900008 . PMID 9876282 . 
  3. ↑ a b Li Y, Ning YS, Li L, Peng DD, Dong WQ, Li M (2005). «Приготовление моноклональных антител против глутаматдегидрогеназы Plasmodium falciparum и создание иммунохроматографического анализа коллоидного золота». Ди И Цзюнь И да Сюэ Сюэ Бао = Академический журнал Первого медицинского колледжа НОАК . 25 (4): 435–438. PMID 15837649 . 
  4. ^ Уорхерст DC, Williams JE (1996). "Проспект ACP № 148. Июль 1996 г. Лабораторная диагностика малярии" . J Clin Pathol . 49 (7): 533–38. DOI : 10.1136 / jcp.49.7.533 . PMC 500564 . PMID 8813948 .  
  5. Перейти ↑ Moody A. (2002). «Экспресс-тесты для диагностики малярийных паразитов» . Clin Microbiol Rev . 15 (1): 66–78. DOI : 10.1128 / CMR.15.1.66-78.2002 . PMC 118060 . PMID 11781267 .  
  6. ^ Мюррей CK, Bennett JW (2008). «Экспресс-диагностика малярии» . Междисциплинарная перспектива Infect Dis . 2009 : 1–7. DOI : 10.1155 / 2009/415953 . PMC 2696022 . PMID 19547702 .  
  7. ^ Пикара- Maureau А, Hempelmann Е, G Krammer, Jackisch Р, Юнг А (1975). "Glutathionstatus in Plasmodium vinckei parasitierten Erythrozyten в Abhängigkeit vom intraerythrozytären Entwicklungsstadium des Parasiten". Тропенмед Паразитол . 26 (4): 405–416. PMID 1216329 . 
  8. ^ Вернер С, Стаббс МТ, Krauth-Siegel RL, Клебе G (2005). «Кристаллическая структура глутаматдегидрогеназы Plasmodium falciparum, предполагаемая цель для новых противомалярийных препаратов». J Mol Biol . 349 (3): 597–607. DOI : 10.1016 / j.jmb.2005.03.077 . PMID 15878595 . 
  9. ^ а б Икбал Дж, Шер А, Раб А (2000). "Plasmodium falciparum, основанный на гистидин-богатом белке 2 диагностический анализ иммунозахвата для малярии: перекрестная реактивность с ревматоидными факторами" . J Clin Microbiol . 38 (3): 1184–1186. DOI : 10.1128 / JCM.38.3.1184-1186.2000 . PMC 86370 . PMID 10699018 .  
  10. ^ Beadle C, Long GW, Вайс WR, МакЭлрой PD, Марет С.М., Oloo AJ, Хоффман SL (1994). «Диагностика малярии путем обнаружения антигена HRP-2 Plasmodium falciparum с помощью экспресс-теста на антиген-захват» . Ланцет . 343 (8897): 564–568. DOI : 10.1016 / S0140-6736 (94) 91520-2 . PMID 7906328 . S2CID 25450213 .  
  11. ^ Rock EP, Marsh K, Савл AJ, Wellems TE, Taylor DW, Maloy WL, Говард RJ (1987). «Сравнительный анализ белков, богатых гистидином Plasmodium falciparum HRP-I, HRP-II и HRP-III у малярийных паразитов различного происхождения». Паразитология . 95 (2): 209–227. DOI : 10.1017 / S0031182000057681 . PMID 3320887 . 
  12. ^ Хумар А, Ohrt С, Харрингтона М.А., Пиллаи D, Каин KC (1997). «Тест Parasight F в сравнении с полимеразной цепной реакцией и микроскопией для диагностики малярии Plasmodium falciparum у путешественников». Am J Trop Med Hyg . 56 (1): 44–48. DOI : 10,4269 / ajtmh.1997.56.44 . PMID 9063360 . 
  13. ^ Бейкер Дж, Маккарти Дж, Гаттон М, Кайл ДЕ, Belizario В, Luchavez Дж, Белл Д, Ченг Q (2005). «Генетическое разнообразие богатого гистидином протеина 2 (PfHRP2) Plasmodium falciparum и его влияние на эффективность диагностических тестов на основе PfHRP2» . J Infect Dis . 192 (5): 870–877. DOI : 10.1086 / 432010 . PMID 16088837 . 
  14. ^ Bzik DJ, Fox BA, Gonyer K (1993). «Экспрессия лактатдегидрогеназы Plasmodium falciparum в Escherichia coli». Мол Биохим Паразитол . 59 (1): 155–166. DOI : 10.1016 / 0166-6851 (93) 90016-Q . PMID 8515777 . 
  15. ^ Вандер Jagt DL, Хансакер Л.А., Гейдрих JE (1981). «Частичная очистка и характеристика лактатдегидрогеназы из Plasmodium falciparum». Молекулярная и биохимическая паразитология . 4 (5–6): 255–264. DOI : 10.1016 / 0166-6851 (81) 90058-X . PMID 7038478 . 
  16. ^ Пенна-Кутинью Дж, Cortopassi В.А., Оливейра А.А., Франса ТК, Krettli АС (2011). «Противомалярийная активность потенциальных ингибиторов фермента лактатдегидрогеназы Plasmodium falciparum, отобранных путем стыковочных исследований» . PLOS ONE . 6 (7): e21237. Bibcode : 2011PLoSO ... 621237P . DOI : 10.1371 / journal.pone.0021237 . PMC 3136448 . PMID 21779323 .  
  17. ^ Икбал Дж, Сиддик А, Джамиль М, PR - Хира (2004). «Стойкий гистидин-богатый протеин 2, паразитарная лактатдегидрогеназа и реактивность панмалярийного антигена после устранения моноинфекции Plasmodium falciparum» . J Clin Microbiol . 42 (9): 4237–4241. DOI : 10.1128 / JCM.42.9.4237-4241.2004 . PMC 516301 . PMID 15365017 .  
  18. ↑ Brown WM, Yowell CA, Hoard A, Vander Jagt TA, Hunsaker LA, Deck LM, Royer RE, Piper RC, Dame JB, Makler MT, Vander Jagt DL (2004). «Сравнительный структурный анализ и кинетические свойства лактатдегидрогеназ четырех видов малярийных паразитов человека». Биохимия . 43 (20): 6219–6229. DOI : 10.1021 / bi049892w . PMID 15147206 . 
  19. ^ Мейера В, Döbeli Н, Certa U (1992). «Стадия-специфическая экспрессия изоферментов альдолазы в паразите малярии грызунов Plasmodium berghei». Мол Биохим Паразитол . 52 (1): 15–27. DOI : 10.1016 / 0166-6851 (92) 90032-F . PMID 1625704 . 
  20. ^ Кнапп В, Hundt Е, Кюппер HA (1990). «Альдолаза Plasmodium falciparum: структура и локализация гена». Мол Биохим Паразитол . 40 (1): 1–12. DOI : 10.1016 / 0166-6851 (90) 90074-V . PMID 2190085 . 
  21. ^ Kim H, Certa U, Döbeli H, P Якоба, Hol WG (1998). «Кристаллическая структура фруктозо-1,6-бисфосфатальдолазы от малярийного паразита человека Plasmodium falciparum». Биохимия . 37 (13): 4388–96. DOI : 10.1021 / bi972233h . PMID 9521758 . 
  22. ^ Шривастава И.К., Шмидт М, Certa U, Döbeli Н, Перрин LH (1990). «Специфичность и ингибирующая активность антител к альдолазе Plasmodium falciparum» . J Immunol . 144 (4): 1497–503. PMID 2406342 . 

Внешние ссылки [ править ]

  • Антитела к малярии
  • Избавиться от малярии
  • Тестирование продуктов ВОЗ, 2008 г.
  • Экспресс-тесты ВОЗ (RDT)