Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску

Подготовка среза или срез мозга - это лабораторный метод в электрофизиологии, который позволяет изучать синапс или нервную цепь изолированно от остальной части мозга в контролируемых физиологических условиях. Ткань головного мозга сначала разрезается с помощью среза ткани, затем погружается в искусственную спинномозговую жидкость (ACSF) для стимуляции и / или записи. Этот метод позволяет улучшить экспериментальный контроль за счет устранения влияния остальной части мозга на интересующий контур , а также тщательный контроль физиологических условий за счет перфузии субстратов черезинкубационная жидкость для точного управления активностью нейротрансмиттеров посредством перфузии агонистов и антагонистов . Однако усиление контроля сопровождается уменьшением легкости, с которой результаты могут быть применены ко всей нейронной системе.

Срезы мозга мыши , схематически

Преимущества и ограничения [ править ]

При исследовании активности ЦНС млекопитающих подготовка срезов имеет несколько преимуществ и недостатков по сравнению с исследованием in vivo. Подготовка срезов и быстрее, и дешевле, чем подготовка in vivo , и не требует анестезии сверх первоначального умерщвления. Удаление мозговой ткани из организма устраняет механические эффекты сердцебиения и дыхания , что позволяет вести расширенную внутриклеточную запись . Физиологические условия выборки, такие как кислород и углекислый газ, или уровней рН от внеклеточной жидкостиможно тщательно отрегулировать и поддерживать в рабочем состоянии. Работа с срезами под микроскопом также позволяет аккуратно размещать регистрирующий электрод, что было бы невозможно в закрытой системе in vivo. Удаление ткани мозга означает отсутствие гематоэнцефалического барьера , который позволяет лекарствам, нейротрансмиттерам или их модуляторам или ионам перфузироваться через нервную ткань. Наконец, хотя цепь, изолированная в срезе мозга, представляет собой упрощенную модель цепи in situ , она поддерживает структурные связи, которые теряются в культурах клеток или гомогенизированной ткани .

Однако приготовление срезов имеет и недостатки. Наиболее очевидно, что в изолированном срезе отсутствуют обычные входные и выходные соединения, присутствующие во всем мозге. Кроме того, сам процесс нарезки может повредить ткань. Чтобы свести к минимуму осложнения в процессе нарезки, можно использовать более сложный резак для тканей, такой как Compresstome, тип вибрирующего микротома, используемого для максимального увеличения количества жизнеспособных тканевых клеток [1] . Кроме того, разрезание мозга может повредить верхнюю и нижнюю части разреза, но, помимо этого, процесс обезглавливанияи извлечение мозга перед помещением среза в раствор может оказывать воздействие на ткань, которое еще не изучено. Во время записи ткань также «стареет», разлагаясь быстрее, чем у интактного животного. Наконец, искусственный состав раствора для купания означает, что присутствие и относительные концентрации необходимых соединений могут отсутствовать.

Ссылки [ править ]

  1. ^ "Прецизионные инструменты: Compresstome" . www.precisionary.com . Проверено 6 сентября 2016 .