Клетки яичника китайского хомяка ( СНО ) представляют собой эпителиальную клеточную линию, полученную из яичника китайского хомяка , часто используемую в биологических и медицинских исследованиях и в коммерческих целях для производства рекомбинантных терапевтических белков . [1] Они нашли широкое применение в исследованиях генетики, скрининга токсичности, питания и экспрессии генов, особенно для экспрессии рекомбинантных белков. Клетки CHO являются наиболее часто используемыми хозяевами млекопитающих для промышленного производства терапевтических рекомбинантных белков. [1]
Китайские хомяки использовались в исследованиях с 1919 года, когда их использовали вместо мышей для типирования пневмококков . Впоследствии было обнаружено, что они являются отличными переносчиками кала-азара ( висцерального лейшманиоза ), что облегчило исследования Leishmania .
В 1948 году китайский хомяк впервые был использован в США для разведения в исследовательских лабораториях. В 1957 году Теодор Т. Пак получил самку китайского хомяка из лаборатории доктора Джорджа Ерганяна в Бостонском фонде исследования рака и использовал ее для получения исходной клеточной линии яичника китайского хомячка (CHO). С тех пор клетки CHO стали предпочтительной клеточной линией из-за их быстрого роста в суспензионной культуре и высокой продукции белка. [2]
Имея очень низкое число хромосом (2n=22) для млекопитающего , китайский хомяк также является хорошей моделью для радиационной цитогенетики и культуры тканей. [3]
Все клеточные линии СНО дефицитны по синтезу пролина . [4] Кроме того, клетки CHO не экспрессируют рецептор эпидермального фактора роста (EGFR), что делает их идеальными для исследования различных мутаций EGFR. [5]
Поскольку исходная клеточная линия СНО была описана в 1956 г., было разработано множество вариантов клеточной линии для различных целей. [4] В 1957 году CHO-K1 был создан из одного клона клеток CHO, [6] CHO-K1 подвергся мутагенезу с помощью этилметансульфоната для создания клеточной линии, лишенной активности дигидрофолатредуктазы (DHFR), получившей название CHO-DXB11 ( также упоминается как CHO-DUKX). [7] Тем не менее, эти клетки после мутагенеза могут вернуться к активности DHFR, что делает их использование для исследований несколько ограниченным. [7] Впоследствии клетки СНО подвергли мутагенезу с помощью гамма-излучения , чтобы получить клеточную линию, в которой оба аллелялокуса DHFR были полностью элиминированы, названы CHO-DG44 [8] . Этим штаммам с дефицитом DHFR для роста требуются глицин , гипоксантин и тимидин . [8] Линии клеток с мутантным DHFR можно использовать для генетических манипуляций, так как клетки трансфицируют интересующим геном вместе с функциональной копией DHFR .ген может быть легко обнаружен в средах, лишенных тимидина. Благодаря этому клетки CHO, лишенные DHFR, являются наиболее широко используемыми клетками CHO для промышленного производства белков. Совсем недавно стали популярными другие системы селекции, а с векторными системами, которые могут более эффективно нацеливаться на активный хроматин в клетках CHO, можно также использовать селекцию антибиотиков (пуромицин) для создания рекомбинантных клеток, экспрессирующих белки на высоком уровне. Для этого было обнаружено, что другие клетки-хозяева, все еще использующие названия, которые применялись в период с 1960-х по 1980-е годы (CHO-K1, CHO-S, CHO-Pro минус и т. д.), производят превосходные уровни белков. Поскольку клетки СНО имеют очень высокую склонность к генетической нестабильности (как и все иммортализованные клетки), не следует полагать, что применяемые названия указывают на их пригодность для производственных целей. Большинство,[4] Широко обсуждалась сложная генетика клеток CHO и вопросы, касающиеся клонального происхождения клеточной популяции. [9]