Из Википедии, бесплатной энциклопедии
Перейти к навигации Перейти к поиску

Fluo-3 - индикатор флуоресценции внутриклеточного кальция (Ca 2+ ). Он используется для измерения Ca 2+ внутри живых клеток в проточной цитометрии и конфокальной лазерной сканирующей микроскопии с использованием возбуждения видимым светом (совместим с источниками аргонового лазера, работающими на 488 нм). Fluo-3 является по существу нефлуоресцентным соединением, но после связывания Ca 2+ его флуоресценция резко возрастает с максимумом испускания при 525 нм, подходящем для обычно используемых детекторов, разработанных для флуоресцеинизотиоцианата.(FITC) измерения. Это большое изменение флуоресценции в сочетании с хорошим выходом фотонов обеспечивает очень высокий контраст, который позволяет обнаруживать микроскопические события высвобождения Ca 2+ внутри клеток, называемые « искрами кальция ». [1] В то время как соли флуо-3 не могут проникать в клетки, загрузка может быть достигнута с использованием его производного ацетоксиметилового (AM) сложного эфира . Попав внутрь клетки, неспецифические эстеразы расщепляют эфир, эффективно улавливая флуо-3. [2]

Поскольку кальций является ключевым вторичным посредником внутри клеток, специфические свойства fluo-3 позволяют исследователям исследовать динамику передачи внутриклеточного сигнала с временным разрешением в различных клетках. [3] [4]

Ссылки [ править ]

  1. ^ Cheng, H .; Lederer, WJ; Каннелл, МБ (1993). «Искры кальция - элементарные события, лежащие в основе взаимодействия возбуждения-сокращения в сердце-мышце». Наука . 262 (5134): 740–744. DOI : 10.1126 / science.8235594 . PMID  8235594 .
  2. ^ Haugland, RP. Справочник флуоресцентных датчиков и продуктов для исследований . Молекулярные зонды, 2010 г.
  3. ^ Gamsjäger, T. Проточная цитометрия внутриклеточного кальция в тромбоцитах . Гринь, 2012
  4. Перейти ↑ Lambert, DG. Протоколы передачи сигналов кальция . Humana Press, 2006 г.