Вектор шаттла


Челночный вектор — это вектор (обычно плазмида ), сконструированный таким образом, чтобы он мог размножаться в двух разных видах хозяев. [1] Таким образом, ДНК, вставленная в челночный вектор, может быть протестирована или манипулирована в двух разных типах клеток. Основное преимущество этих векторов заключается в том, что ими можно манипулировать в E. coli , а затем использовать в системе, которую сложнее или медленнее использовать (например, в дрожжах).

Челночные векторы включают плазмиды, которые могут размножаться в эукариотах и ​​прокариотах (например, как в Saccharomyces cerevisiae , так и в Escherichia coli ) или в различных видах бактерий (например, в E.coli и Rhodococcus erythropolis ). Существуют также аденовирусные челночные векторы, которые могут размножаться в E. coli и млекопитающих.

Челночные векторы часто используются для быстрого создания нескольких копий гена в E. coli (амплификация). Их также можно использовать для экспериментов и модификаций in vitro (например, мутагенеза , ПЦР ).

Одним из наиболее распространенных типов челночных векторов является дрожжевой челночный вектор. [2] Почти все широко используемые векторы S. cerevisiae являются челночными векторами. Дрожжевые челночные векторы содержат компоненты, которые позволяют осуществлять репликацию и селекцию как в клетках E. coli , так и в дрожжевых клетках. Компонент E.coli дрожжевого челночного вектора включает точку начала репликации и селектируемый маркер, например, устойчивость к антибиотикам , бета-лактамазу , бета-галактозидазу. Дрожжевой компонент дрожжевого челночного вектора включает автономно реплицирующуюся последовательность (ARS), дрожжевую центромеру (CEN) и селектируемый дрожжевой маркер (например, URA3 , ген, который кодирует фермент синтеза урацила , Lodish et al. 2007).