Суправитальное окрашивание - это метод окрашивания, используемый в микроскопии для изучения живых клеток, которые были удалены из организма. Это отличается от прижизненного окрашивания , которое осуществляется путем инъекции или иного введения пятна в организм. Таким образом, суправитальное окрашивание может обладать большей токсичностью , так как лишь нескольким клеткам необходимо выжить в нем на короткое время. Термин « витальное пятно » используется некоторыми авторами для обозначения прижизненного окрашивания, а другими является взаимозаменяемым с суправитальным пятном, основная концепция заключается в том, что исследуемая клетка все еще жива. Поскольку клетки живые и незакрепленные, вне тела суправитальные пятна носят временный характер. [1] [2]
Наиболее распространенное суправитальное окрашивание выполняется на ретикулоцитах с использованием нового метиленового синего или блестящего крезилового синего , что позволяет увидеть ретикулофиламентный узор рибосом, характерных для этих живых незрелых эритроцитов наджизненными пятнами. Подсчитывая количество таких клеток, можно определить скорость образования красных кровяных телец, что дает представление об активности костного мозга и анемии . [3] Это контрастирует с витальным окрашиванием , когда используемый краситель исключаетсяот живых клеток, так что только мертвые клетки окрашиваются положительно. (К жизненно важным красителям относятся такие красители, как трипановый синий и йодид пропидия , которые либо слишком объемны, либо слишком заряжены, чтобы пересекать клеточную мембрану, либо активно быстро вытесняются живыми клетками.)
Суправитальное окрашивание можно комбинировать с окрашиванием антителами на клеточной поверхности ( иммунофлуоресценция ) для таких приложений, как анализ FACS . [4] Иммунофлуоресценцию можно также проводить внутри живых клеток путем обратимой проницаемости клеток с использованием детергента Triton X-100 . Тщательно отрегулированная до концентрации, соответствующей количеству клеток, предварительная обработка может обеспечить доступ молекул от 1 до 150 килодальтон внутрь клетки. [5] Хотя в этом контексте аналогичным образом можно использовать антитела, термин «суправитальное пятно» обычно используется для более мелких химических веществ, которые обладают подходящими свойствами.
Примеры распространенных суправитальных красителей [ править ]
Суправитальные красители для эритроцитов: [6]
- Новый метиленовый синий
- Блестящий крезиловый синий
- Кристально-фиолетовый
- Метиловый фиолетовый
- Нильский синий
Ссылки [ править ]
- ^ "Английский медицинский словарь" .
- ^ Н. Чендлер Фут (1954). «Жизненное окрашивание». Летопись Нью-Йоркской академии наук . 59 (2): 259–267. DOI : 10.1111 / j.1749-6632.1954.tb45936.x . PMID 13229212 .
- ^ Джон П. Грир; Максвелл Майер Винтроб (2008). Клиническая гематология Винтроба . ISBN 9780781765077.
- ^ Тина Карлсен; Ричард Ланглуа; Эрин Бисселл. «Заключительный отчет о проверке концепции иммуноанализа / системы жизненно важных пятен (IVSS)» (PDF) . Ливерморская национальная лаборатория Лоуренса.
- ^ Anne L ван де Вен, Карен Адлер-Storthz, и Ребекка Ричардс-Kortum (2009). «Доставка оптических контрастных агентов с использованием Triton-X100, часть 1: обратимая проницаемость живых клеток для внутриклеточного мечения» . J Biomed Opt . 14 (2): 021012. DOI : 10,1117 / 1,3090448 . PMC 2748244 . PMID 19405725 . CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
- ^ 2011 гематология, клиническая микроскопия и глоссарий биологических жидкостей от CAP
