Эфтилагимод альфа

Эфтилагимод альфа ( INN ; ^[1] код разработки IMP321 или efti ) - это крупномолекулярный противораковый препарат, разрабатываемый биотехнологической компанией Immutep, занимающейся клиническими исследованиями . Efti - это растворимая версия молекулы иммунной контрольной точки LAG-3 . Это активатор APC, который используется для усиления иммунного ответа на опухоли и вводится подкожно . Efti предлагает три предполагаемых клинических варианта:

• в качестве адъюванта противораковых вакцин (в низкой эффективной дозе ~ 250 мкг)
• как химио-иммунотерапия первой линии , то есть в сочетании со стандартной химиотерапией (например, паклитакселом )
• в комбинированной иммунотерапии с лечением PD-1 (например, пембролизумаб )

Эфтилагимод альфа проходит II фазу клинических испытаний. В настоящее время основными показаниями к применению препарата являются метастатический рак молочной железы , немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ) и плоскоклеточный рак головы и шеи (HNSCC).

Фон

Эфтилагимод альфа (сокращенно эфти) представляет собой растворимый слитый белок LAG-3, который активирует антигенпрезентирующие клетки . Это белок 160 кДа, состоящий из четырех внеклеточных доменов LAG-3, слитых с Fc-областью IgG1 (LAG-3Ig). Efti связывается преимущественно с подмножеством молекул MHC класса II, которые обогащены липидными рафтами и / или состоят из стабильных комплексов пептид-MHC II (pMHCII). На Т-клетках заякоренный в мембране LAG-3 является ингибирующим рецептором, подавляющим передачу сигналов Т-клеточного рецептора (TCR). Efti - как растворимый белок LAG-3 - является агонистом MHC класса II и, следовательно, активатором дендритных клеток, вызывая повышенную презентацию антигена цитотоксическим (CD8 +) Т-клеткам.. В отсутствие презентации антигена через молекулы MHC класса II, efti реактивирует спящие антиген-испытанные Т-клетки памяти , позволяя им распознавать свои антигенные мишени в месте опухоли.

История

Растворимый LAG-3 был впервые установлен в качестве активатора дендритных клеток в конце 1990-х годов. Фредерик Трибель , открывший LAG-3 в 1990 году ^[2], работал в течение 1990-х годов в своей лаборатории в Институте Густава Русси в сотрудничестве с INSERM и Merck Serono , чтобы выяснить роль LAG-3 в адаптивной иммунной системе. Triebel et al. успешно произвел растворимый слитый белок LAG-3Ig к 1995 году и впоследствии обнаружил его противораковые свойства in vivo.в различных моделях опухолей мышей в 1990 году. Вскоре после этого, в 2001 году, Трибель основал биотехнологическую компанию под названием Immutep SA с целью развития терапевтического потенциала LAG-3. Immutep был приобретен Prima BioMed в 2014 году, и в результате Eftilagimod alpha стал ведущим соединением Prima BioMed. В 2017 году Prima BioMed изменила свое название на Immutep, чтобы отразить ее направленность на развитие терапии LAG-3.

Клинические испытания

Текущие клинические исследования

По состоянию на февраль 2020 года продолжаются три клинических исследования:

Метастатическая карцинома молочной железы (HER2 ^- HR ⁺ )

В исследовании AIPAC эфти назначают в комбинации с паклитакселом женщинам с HER2 ^- метастатическим раком молочной железы, заболевание которых прогрессировало после эндокринной терапии. Это исследование фазы IIb представляет собой рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование, целью которого является включение 241 пациента. В нем проходила открытая вводная фаза, на которой проходило лечение 15 пациентов, и результаты были опубликованы на ежегодном собрании ASCO в 2018 году. Исследование продолжается и, как ожидается, даст результаты в первой половине 2020 года.

Солидные опухоли

В исследовании INSIGHT Phase I изучается возможность и безопасность различных путей доставки лекарств (например, внутриопухолевый, внутрибрюшинный и подкожный).

Немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ) и плоскоклеточный рак головы и шеи (HNSCC)

В исследовании фазы II TACTI-002 эфти вводили в комбинации с пембролизумабом при трех различных и независимых показаниях к раку (в соответствии с планом исследования корзины):

1. Метастатический НМРЛ первой линии
2. Метастатический НМРЛ второй линии у пациентов, невосприимчивых к терапии PD-L1 или PD-1, такой как пембролизумаб, ниволумаб, авелумаб)
3. HNSCC второй линии

По каждому из трех показаний лечится первая когорта пациентов, и только при достижении определенного заранее определенного количества ответов опухоли может быть включена вторая когорта пациентов. Это следует за двухступенчатым дизайном Саймонса. На заседании SITC в 2019 году Immutep опубликовал промежуточные результаты своего исследования метастатического НМРЛ первой линии, прежде чем объявить, что этап 2 исследования официально начался. В начале 2020 года Immutep также объявила в пресс-релизе о продолжении второго этапа исследования в HNSCC.

Завершенные клинические испытания

Исследование фазы I меланомы, 2016-2019 гг.

В исследовании TACTI-mel Phase I изучалась безопасность и потенциальный синергизм efti в сочетании с пембролизумабом, антителом к ​​программируемой гибели клеток (PD-1), при неоперабельной или метастатической меланоме. Исследование отмечено как завершенное на сайте Clinicaltrials.gov; окончательные результаты были опубликованы на Всемирном конгрессе по иммунотерапии 2019 года в Базеле, Швейцария. О каких-либо серьезных проблемах безопасности и предварительных результатах безопасности не сообщалось.

Исследование фазы I рака поджелудочной железы, 2009-2012 гг.

В апреле 2009 года Immutep объявила о своем участии в Фазе I исследования рака поджелудочной железы, проводимого в Медицинской школе Вашингтонского университета в Сент-Луисе, штат Миссури . В этом исследовании с участием 18 пациентов ^[3] оценивалась безопасность комбинации эфти с гемцитабином , химиотерапевтическим препаратом, в дозах до 2 мг. Комбинация оказалась безопасной, однако при сравнении уровней моноцитов, дендритных клеток и Т-клеток до и после лечения не наблюдалось значительных различий, вероятно, из-за неоптимального дозирования. Результаты исследования были опубликованы онлайн в Investigational New Drugs в августе 2012 года.

Исследование фазы IIa метастатического рака груди, 2006-2010 гг.

Открытое исследование фазы IIa с участием 30 пациентов при HER2-отрицательном метастатическом раке молочной железы ^[4] показало, что efti работает как химио-иммунотерапевтическое средство при раке молочной железы, при этом химиотерапия создает опухолевый дебрис (циркулирующий опухолевый антиген), а efti увеличивает активацию антигенпрезентирующие клетки (APC) по мере того, как они поглощают этот мусор. Это испытание было частично основано на выводах онлайн-статьи в журнале Cancer Letters, опубликованной в июне 2005 года двумя исследователями из Центра Рене Хугенина в Сен-Клу, недалеко от Парижа.который сотрудничал с Фредериком Трибелем. Эта статья продемонстрировала, что уровень растворимого в сыворотке LAG-3 коррелировал с улучшением выживаемости у пациентов с раком груди, опухоли которых были положительными по рецепторам эстрогена или прогестерона. В исследовании пациентам, еженедельно принимавшим низкие дозы паклитаксела (химиотерапия), вводили возрастающие подкожные дозы эфти на 2 и 16 дни 28-дневного цикла паклитаксела в течение шести циклов. Максимальная доза эфти составляла 6,25 мг. Паклитаксел вводили в дни 1, 8 и 15, что означает, что пациентам вводили эффективно на следующий день после того, как паклитаксел убил некоторые опухолевые клетки, что привело к тому, что антигенные остатки опухоли обработались дендритными клетками для презентации антигена CD8 + Т-клеткам. В этом исследовании было два заметных результата:

• Скорость отклика . К шестимесячной конечной точке 90% пациентов испытали клиническое улучшение. Общая частота ответа составила 50% на основании критериев RECIST, что выгодно по сравнению с частотой ответа 25%, наблюдаемой у пациентов на монотерапии паклитакселом в исследовании ECOG2100. Ведущие исследователи комбинированного исследования химио-иммунотерапии также отметили соответствующие различия в группах пациентов двух исследований: пациенты ECOG2100 были в среднем моложе, чем в исследовании химио-иммунотерапии, и значительно меньший процент имел заболевание в трех или более участках исследования. вступление в суд.
• Увеличение количества соответствующих ячеек . Наблюдалось устойчивое увеличение количества моноцитов , NK-клеток и активированных CD8 + T-клеток в образцах крови пациентов по сравнению с исходными данными, причем увеличение на шестимесячной отметке имело статистическую значимость в каждом случае. Кроме того, процент PBMC, представленных дендритными клетками и терминально дифференцированными эффекторными Т-клетками памяти, увеличился, опять же со статистической значимостью.

Результаты этого исследования были опубликованы в январе 2010 года, а после устной презентации на Ежегодном собрании ASCO в июне 2010 года результаты были опубликованы в июле 2010 года в Журнале трансляционной медицины . Исследование послужило основой для подачи новой заявки на патент на эфтилагимод альфа.

Исследование фазы Ib почечно-клеточного рака, 2005-2009 гг.

Первое исследование I фазы эффективности Immutep у онкологических больных было открытым исследованием у 21 пациента с метастатической почечно-клеточной карциномой, при этом препарат использовался в качестве монотерапии. ^[5] Было известно, что у этих пациентов был ослаблен иммунитет . Исследование, начавшееся в конце 2005 года, показало, что пациенты вводили возрастающие дозы эфти (до 30 мг на подкожную инъекцию) каждые две недели за шесть инъекций. Препарат, по-видимому, работал в двух самых высоких дозах - 6 мг и 30 мг, с основными результатами среди восьми пациентов, получивших эти дозы:

• Активированные Т-клетки . У восьми пациентов наблюдалась стойкая активация CD8 + Т-клеток (измеряемая по проценту CD8 + Т-клеток, экспрессирующих CD69 , CD38 , HLA-DR ), которая была статистически значимой по сравнению с более низкими дозами (p = 0,016). Был больший процент CD8 + Т-клеток эффекторной памяти (CD45RO ^hi , CD45RA- и CD62L-), опять же, статистически значимый по сравнению с более низкими дозами (p = 0,008). И было увеличение экспрессии костимулирующих молекул CD27 и CD28 (CD27 + CD28 +, p = 0,016; и CD27-CD28 +, p = 0,014).
• Устойчивое заболевание . 7 из 8 пациентов, получавших дозу 6 мг, имели стабильное заболевание через 3 месяца по сравнению с только 3 из 11 пациентов, получавших более низкие дозы. Эти результаты имели статистическую значимость (р = 0,015).

Результаты были опубликованы в журнале Clinical Cancer Research в сентябре 2009 года.

Ранние экспериментальные исследования, 2005-2007 гг.

Immutep провел два исследования фазы I, предназначенных для оценки безопасности, а также профиля иммунного ответа efti у людей:

• В статье, опубликованной в марте 2007 г. в « Журнале иммунной терапии и вакцин», показано, что эфти может увеличивать потенцирование Т-клеточного ответа у здоровых субъектов, которым вводят поверхностный антиген гепатита В HBsAg . В этом рандомизированном и контролируемом исследовании, проведенном в Париже в 2005 г. ^[6], 40 здоровых субъектов были иммунизированы 10 мкг HBsAg, а затем введены физиологический раствор (8 субъектов) или возрастающие дозы эфти до 100 мкг (32 субъекта). Еще 8 субъектов получили обычную вакцину против гепатита B, продукт Engerix-B компании GlaxoSmithKline . У субъектов, которым вводили efti, были более высокие уровни антитела HBsAg в крови, а также более высокие уровни антиген-специфических Т-клеток.
• Интернет-статья в журнале Vaccine, опубликованная в апреле 2007 года, показала аналогичное усиление Т-клеточного ответа, на этот раз с 60 здоровыми субъектами, которым вводили вакцину от гриппа Novartis Agrippal. ^[7] Это исследование, начатое в 2005 году и завершенное в середине 2006 года, сравнивало вакцину против гриппа с вакциной плюс эфти в дозах до 100 мкг. У субъектов, получавших эфТИ, в PBMC были более высокие уровни CD4 + Т-клеток Th1-типа.

Доклиническая работа, 2000-2008 гг.

В период с 2000 по 2008 год был продемонстрирован ряд демонстраций эффективности efti in vitro и in vivo :

• В июньской статье 2000 г. в Journal of Immunology показано, что efti (LAG-3Ig) может действовать как адъювант вакцины при иммунизации мышей поверхностным антигеном гепатита B и растворимым овальбумином .
• В статье, опубликованной в апреле 2002 года в Journal of Immunology, был показан механизм действия efti в индукции созревания и активации дендритных клеток, происходящих из моноцитов человека, посредством чего efti связывается с молекулами MHC класса II, экспрессируемыми в липидных рафтах плазматической мембраны на незрелых дендритных клетках, и вызывает морфологические изменения. изменения, такие как образование дендритных выступов, активация костимулирующих молекул и выработка IL-12 и TNF-α .
• В статье, опубликованной в феврале 2003 г. в Vaccine, показано, что в незрелых дендритных клетках человека, происходящих из моноцитов, efti может индуцировать выработку хемокинов, которые будут направлять миграцию созревающих дендритных клеток в лимфатические узлы. Примечательно, что LAG-3-созревшие дендритные клетки были активированы для CCR7 . Позже те же авторы показали, что растворимый LAG-3 может снижать дифференцировку макрофагов и дендритных клеток из моноцитов, предполагая, что положительный эффект LAG-3 как активатора дендритных клеток применяется к уже существующим дендритным клеткам.
• В опубликованной в марте 2003 г. статье ученых из Туринского университета, опубликованной в журнале Cancer Research , соавтором которой был Трибель, было показано, что у мышей efti может усиливать действие ДНК-вакцины, нацеленной на HER2, в модели спонтанного рака молочной железы.
• Онлайн-статья в журнале Vaccine от марта 2006 года показала на животных моделях, что efti может иммуно-потенцировать терапевтические вакцины , вызывая созревание дендритных клеток.
• В опубликованной в апреле 2006 г. статье в Cancer Research было показано, что in vitro efti может индуцировать антиген-специфический CD8 + Т-клеточный ответ в PBMC человека, о чем свидетельствует повышающая регуляция Т-клеток, которые проявляют цитотоксическую активность и продуцируют цитокины Tc1. Исследователи для этой работы использовали антиген белка матрикса гриппа и опухолевые антигены Melan-A / MART-1 и сурвивин, чтобы проверить этот CD8 + Т-клеточный ответ. Они обнаружили, что связанный с LAG-3 адъювантный эффект зависит от прямой активации антигенпрезентирующих клеток. Для этой статьи Трибель сотрудничал с учеными из Национального института тумори в Милане, Италия .
• Статья в сентябре 2007 года в Journal of Immunology показала, что efti может индуцировать активацию большого количества эффекторных Т-клеток человека, что приводит к продукции IFN-γ и TNF-α, среди других цитокинов. Исследователи обнаружили, что эффекторная и эффекторная память, но не наивные или центральные Т-клетки памяти , были индуцированы efti на полный ответ Tc1. В их пробиркеРаботая с образцами крови человека, исследователи обнаружили, что efti связывает все циркулирующие дендритные клетки и часть моноцитов MHC класса II +. Примечательно, что 92% образцов дали клинически значимый ответ на первое короткое воздействие efti. Исследователи сравнили эффективность efti с агонистами TLR1-9, которые, хотя и индуцируют IL-10, не способны индуцировать ответ Tc1 IFN-γ.
• В статье, опубликованной в марте 2008 г. в Journal of Immunology , опять же в сотрудничестве с Instituto Nazionale dei Tumori, in vitro показано, что efti может индуцировать созревание дендритных клеток, происходящих из моноцитов, для производства хемокинов и TNF-α, и что при введении с CD40 / CD40L, он может вызывать полную функциональную активацию дендритных клеток, чтобы они могли производить повышенные уровни IL-12. IL-12 необходим для индукции IFN-γ, что, в свою очередь, имеет решающее значение для индукции Th1-клеток.
• В статье, опубликованной в июне 2008 г. в журнале Clinical Cancer Research, показано, что эфти в низких дозах можно использовать в качестве Т-клеточного адъюванта для противораковых вакцин. Для этой работы Трибель сотрудничал с Cell Genesys, компанией по производству противораковых вакцин из Южного Сан-Франциско. Ведущий продукт Cell Genesys, GVAX, состояла из целых опухолевых клеток, генетически модифицированных для секреции GM-CSF. Когда мыши, которым была привита линия клеток меланомы мыши B16, получали как GVAX, так и 0,1 мкг растворимого LAG-3, результатом было 7-дневное медианное преимущество в выживаемости (от 47 до 54 дней) по сравнению с мышами, которые получали только GVAX в день. 3. В соответствии с этими данными о выживаемости, исследователи отметили более высокие уровни инфильтрирующих опухоль лимфоцитов для комбинированной группы и большее количество антиген-специфических CD8 + Т-клеточных ответов. Также был заметный гуморальный ответ IgG1.

Возможное использование в вакцине против рака печени

В мае 2015 года Immutep (в то время Prima Biomed) объявил о сотрудничестве с NEC Corporation и Университетом Ямагути в Японии, в рамках которого исследователи Ямагути будут комбинировать efti с пептидной вакциной, которую они разработали в качестве потенциального терапевтического средства для лечения гепатоцеллюлярной карциномы .

Лицензирование в Китае

Immutep передал права на efti в материковом Китае , Гонконге , Макао и Тайване в октябре 2013 года частной китайской фармацевтической компании Eddingpharm . ^[8]

Производство

Efti производится в ячейках CHO . Immutep работал с Henogen в качестве контрактной производственной организации, чтобы обеспечить efti для всех испытаний до 2014 года. Immutep сменил своего контрактного производителя на WuXi PharmaTech из Шанхая , которая начала производить efti для всех испытаний, начиная с 2016 года. 200-литровые партии efti принимаются для клинических испытаний несколькими национальными агентствами, включая FDA, PEI и MHRA. Недавно появилась информация о том, что началось увеличение объема до 2000 литров.

использованная литература