Окраска по Граму
Окрашивание по Граму или окрашивание по Граму , также называемое методом Грама , представляет собой метод окрашивания , используемый для классификации видов бактерий на две большие группы: грамположительные бактерии и грамотрицательные бактерии . Название происходит от датского бактериолога Ганса Кристиана Грама , который разработал метод в 1884 году. [1]
Окрашивание по Граму позволяет дифференцировать бактерии по химическим и физическим свойствам их клеточных стенок . Грамположительные клетки имеют толстый слой пептидогликана в клеточной стенке, который сохраняет первичную окраску — кристаллический фиолетовый . Грамотрицательные клетки имеют более тонкий пептидогликановый слой, что позволяет вымывать кристаллический фиолетовый при добавлении этанола . Они окрашиваются в розовый или красный цвет при контрастном окрашивании [2] , обычно сафранином или фуксином . Раствор Люголя всегда добавляют после добавления кристаллического фиолетового, чтобы укрепить связи красителя с клеточной мембраной .
Окрашивание по Граму почти всегда является первым шагом в предварительной идентификации бактериального организма. Хотя окрашивание по Граму является ценным диагностическим инструментом как в клинических, так и в исследовательских целях, не все бактерии могут быть окончательно классифицированы с помощью этого метода. Это приводит к грам-вариабельным и грам-неопределимым группам.
Метод назван в честь его изобретателя, датского ученого Ганса Христиана Грама (1853–1938), который разработал эту методику, работая с Карлом Фридлендером в морге городской больницы Берлина в 1884 г. Грам разработал свою методику не для того, чтобы отличить один тип бактерий от другого, но сделать бактерии более заметными в окрашенных срезах легочной ткани. [3] Он опубликовал свой метод в 1884 году и включил в свой краткий отчет наблюдение, что бацилла тифа не сохраняет пятно. [4]
Окрашивание по Граму — это бактериологический лабораторный метод [5] , используемый для дифференциации видов бактерий на две большие группы ( грамположительные и грамотрицательные ) на основе физических свойств их клеточных стенок . [6] [ требуется страница ] Окрашивание по Граму не используется для классификации архей , ранее называвшихся археобактериями, поскольку эти микроорганизмы дают сильно различающиеся реакции, которые не соответствуют их филогенетическим группам . [7]
Некоторые организмы вариабельны по грамму (это означает, что они могут окрашиваться как отрицательно, так и положительно); некоторые из них не окрашиваются ни одним из красителей, используемых в технике Грама, и их не видно. В современной лаборатории экологической или молекулярной микробиологии большая часть идентификации выполняется с использованием генетических последовательностей и других молекулярных методов, которые гораздо более специфичны и информативны, чем дифференциальное окрашивание.
