Из Википедии, бесплатной энциклопедии
  (Перенаправлено из TALENS )
Перейти к навигации Перейти к поиску
Рисунок с заполнением пространства димерного слияния TALE-FokI (синий: TALE; зеленый: FokI), связанный с ДНК ( PDB : 1FOK , 3UGM ), сделанный Дэвидом Гудселлом
Часть серии по
Генная инженерия
Генная инженерия logo.png
 
Генетически модифицированные организмы
История и регулирование
Процесс
Приложения
Споры

Эффекторные нуклеазы, подобные активатору транскрипции ( TALEN ), представляют собой рестрикционные ферменты, которые могут быть сконструированы для разрезания определенных последовательностей ДНК. Их получают путем слияния эффекторного ДНК-связывающего домена TAL с доменом расщепления ДНК ( нуклеаза, которая разрезает цепи ДНК). Эффекторы, подобные активатору транскрипции (TALE), могут быть сконструированы для связывания практически с любой желаемой последовательностью ДНК, поэтому в сочетании с нуклеазой ДНК можно разрезать в определенных местах. [1] Рестрикционные ферменты могут быть введены в клетки для использования при редактировании генов или для редактирования генома in situ , метод, известный какредактирование генома с помощью инженерных нуклеаз . Наряду с нуклеазами «цинковые пальцы» и CRISPR / Cas9 , TALEN является важным инструментом в области редактирования генома .

TALE ДНК-связывающий домен [ править ]

Эффекторы TAL - это белки, которые секретируются бактериями Xanthomonas через их систему секреции типа III, когда они заражают растения . [2] ДНК-связывающий домен содержит повторяющуюся высококонсервативную последовательность из 33–34 аминокислот с расходящимися 12-ю и 13-ю аминокислотами. Эти две позиции, называемые Repeat Variable Diresidue (RVD), очень вариабельны и показывают сильную корреляцию со специфическим распознаванием нуклеотидов . [3] [4] Эта прямая взаимосвязь между аминокислотной последовательностью и распознаванием ДНК позволила конструировать специфические ДНК-связывающие домены путем выбора комбинации повторяющихся сегментов, содержащих соответствующие RVD. [1] Примечательно, что небольшие изменения в RVD и включение «нетрадиционных» последовательностей RVD могут улучшить специфичность нацеливания. [5]

Домен расщепления ДНК [ править ]

Неспецифический домен расщепления ДНК на конце эндонуклеазы FokI можно использовать для конструирования гибридных нуклеаз , активных в дрожжевом тесте. [6] [7] Эти реагенты также активны в клетках растений [8] [9] и в клетках животных. [9] [10] [11] [12] Первоначальные исследования TALEN использовали домен расщепления FokI дикого типа, но в некоторых последующих исследованиях TALEN [11] [13] [14] также использовались варианты домена расщепления FokI с мутациями, предназначенными для улучшения расщепления. специфичность [15] [16] и активность расщепления. [17]Домен FokI функционирует как димер, для чего требуются две конструкции с уникальными ДНК-связывающими доменами для сайтов в целевом геноме с правильной ориентацией и расстоянием. Как количество аминокислотных остатков между ДНК-связывающим доменом TALE и доменом расщепления FokI, так и количество оснований между двумя отдельными сайтами связывания TALEN, по-видимому, являются важными параметрами для достижения высоких уровней активности. [10] [18]

Инженерные конструкции TALEN [ править ]

Простая взаимосвязь между аминокислотной последовательностью и ДНК-узнаванием связывающего домена TALE позволяет эффективно создавать белки. В этом случае искусственный синтез гена проблематичен из-за неправильного отжига повторяющейся последовательности, обнаруженной в связывающем домене TALE. [19] Одним из решений этого является использование общедоступной программы (DNAWorks [20] ) для расчета олигонуклеотидов, подходящих для сборки в двухэтапной ПЦР- сборке олигонуклеотидов с последующей амплификацией целого гена. Также сообщалось о ряде модульных схем сборки для создания инженерных конструкций TALE. [9] [19] [21] [22][23] [24] Оба метода предлагают систематический подход к конструированию ДНК-связывающих доменов, который концептуально аналогичен модульному методу сборки для созданиядоменов узнавания ДНК цинкового пальца .

Рабочий процесс редактирования генома вашего любимого гена (YFG) с помощью TALEN. Целевая последовательность идентифицируется, соответствующая последовательность TALEN конструируется и вставляется в плазмиду. Плазмида вставляется в клетку-мишень, где она транслируется с образованием функционального TALEN, который проникает в ядро, связывает и расщепляет последовательность-мишень. В зависимости от приложения это может быть использовано для внесения ошибки (для нокаутации целевого гена) или для введения новой последовательности ДНК в целевой ген.

Трансфекция [ править ]

После сборки конструкций TALEN их вставляют в плазмиды ; затем клетки-мишени трансфицируют плазмидами, генные продукты экспрессируются и попадают в ядро ​​для доступа к геному. В качестве альтернативы конструкции TALEN могут быть доставлены в клетки в виде мРНК, что устраняет возможность геномной интеграции белка, экспрессирующего TALEN. Использование мРНК-вектора также может резко повысить уровень гомологически направленной репарации (HDR) и успешность интрогрессии во время редактирования гена.

Редактирование генома [ править ]

Механизмы [ править ]

TALEN можно использовать для редактирования геномов, вызывая двухцепочечные разрывы (DSB), на которые клетки реагируют с помощью механизмов восстановления.

Негомологичное соединение концов (NHEJ) непосредственно лигирует ДНК с любой стороны двухцепочечного разрыва, где существует очень небольшое перекрытие последовательностей для отжига или его нет вовсе. Этот механизм репарации вызывает ошибки в геноме через инделки (вставки или делеции) или хромосомную перестройку; любые такие ошибки могут сделать генные продукты, закодированные в этом месте, нефункциональными. [10] Поскольку эта активность может варьироваться в зависимости от вида, типа клеток, используемого гена-мишени и нуклеазы, ее следует контролировать при разработке новых систем. Может быть проведен простой анализ гетеродуплексного расщепления, который обнаруживает любое различие между двумя аллелями, амплифицированными с помощью ПЦР. Продукты расщепления можно визуализировать на простых агарозных гелях или пластинчатых гелевых системах.

Альтернативно ДНК может быть введена в геном через NHEJ в присутствии экзогенных фрагментов двухцепочечной ДНК. [10]

Гомологически направленная репарация также может вводить чужеродную ДНК в DSB, поскольку трансфецированные двухцепочечные последовательности используются в качестве матриц для ферментов репарации. [10]

Приложения [ править ]

TALEN использовался для эффективной модификации геномов растений [25], создавая экономически важные продовольственные культуры с благоприятными питательными качествами. [26] Их также использовали для разработки инструментов для производства биотоплива . [27] Кроме того, он был использован для создания стабильно модифицированных эмбриональных стволовых клеток человека и индуцированных клонов плюрипотентных стволовых клеток (IPSC) и линий эритроидных клеток человека [11] [28] для создания нокаута C. elegans , [12] нокаута крысы , [13] мыши с нокаутом, [29] и рыбки данио с нокаутом .[14] [30] Кроме того, этот метод можно использовать для создания организмов, вызывающих нокаут. Wu et al. Получили крупный рогатый скот с нокаутом Sp110, используя никазы Талена для индукции повышенной устойчивости туберкулеза. [31] Этот подход также использовался для создания крыс с нокаутом посредством микроинъекции мРНК TALEN в одноклеточные эмбрионы. [32]

TALEN также использовался экспериментально для исправления генетических ошибок, лежащих в основе болезни. [33] Например, он был использован в пробирке , чтобы исправить генетические дефекты , которые вызывают расстройства , такие как серповидно - клеточной анемии , [28] [34] пигментная ксеродерма , [35] и эпидермолиз буллезной . [36] Недавно было показано, что TALEN может быть использован в качестве инструмента, позволяющего использовать иммунную систему для борьбы с раком; TALEN-опосредованное нацеливание может генерировать Т-клетки, устойчивые к химиотерапевтическим препаратам и проявляющие противоопухолевую активность. [37] [38]

Теоретически, геномная специфичность сконструированных слияний TALEN позволяет исправлять ошибки в отдельных генетических локусах посредством гомологически направленной репарации с правильной экзогенной матрицы. [33] В действительности, однако, применение TALEN in situ в настоящее время ограничено из-за отсутствия эффективного механизма доставки, неизвестных иммуногенных факторов и неопределенности в специфичности связывания TALEN. [33]

Еще одно новое применение TALEN - это его способность сочетаться с другими инструментами геномной инженерии, такими как мегануклеазы . Область связывания ДНК эффектора TAL может быть объединена с доменом расщепления мегануклеазы для создания гибридной архитектуры, сочетающей простоту инженерии и высокоспецифичную активность связывания ДНК эффектора TAL с низкой частотой сайтов и специфичностью мегануклеазы. [39]

По сравнению с другими методами редактирования генома TALEN находится посередине по сложности и стоимости. В отличие от ZFN , TALEN распознает одиночные нуклеотиды. Гораздо проще спроектировать взаимодействия между ДНК-связывающими доменами TALEN и их целевыми нуклеотидами, чем создать взаимодействия с ZNF и их триплетами целевых нуклеотидов. [40] С другой стороны, CRISPR полагается на образование рибонуклеотидного комплекса, а не на распознавание белок / ДНК. gRNA могут быть нацелены практически на любую последовательность в геноме, и их можно получить дешево, что делает CRISPR более эффективным и менее дорогим, чем TALEN и ZFN. TALEN в конечном итоге в 200 раз дороже, чем CRISPR, и для его выполнения требуется на несколько месяцев больше.

Точность эффекторной нуклеазы TAL [ править ]

Нецелевое действие активной нуклеазы может приводить к нежелательным двухцепочечным разрывам и, как следствие, к хромосомным перестройкам и / или гибели клеток. Были проведены исследования для сравнения относительной токсичности, связанной с нуклеазами, доступных технологий. Основываясь на этих исследованиях [18] и максимальном теоретическом расстоянии между связыванием ДНК и нуклеазной активностью, считается, что конструкции TALEN обладают наибольшей точностью среди доступных в настоящее время технологий. [41]

См. Также [ править ]

  • Редактирование генома с помощью инженерных нуклеаз
  • Нуклеаза цинкового пальца
  • Мегануклеаза
  • CRISPR

Ссылки [ править ]

  1. ^ a b Boch J (февраль 2011 г.). «СКАЗКИ о нацеливании на геном». Природа Биотехнологии . 29 (2): 135–6. DOI : 10.1038 / nbt.1767 . PMID  21301438 .
  2. ^ Boch J, Bonas U (сентябрь 2010). "Эффекторы Xanthomonas AvrBs3 типа III: открытие и функции". Ежегодный обзор фитопатологии . 48 : 419–36. DOI : 10.1146 / annurev-phyto-080508-081936 . PMID 19400638 . 
  3. ^ Boch J, Scholze H, Schornack S, Landgraf A, Hahn S, Kay S, Lahaye T, Nickstadt A, Bonas U (декабрь 2009 г.). «Нарушение кода специфичности связывания ДНК эффекторов TAL-типа III». Наука . 326 (5959): 1509–12. Bibcode : 2009Sci ... 326.1509B . DOI : 10.1126 / science.1178811 . PMID 19933107 . 
  4. ^ Moscou MJ, Bogdanove AJ (декабрь 2009). «Простой шифр управляет распознаванием ДНК эффекторами TAL». Наука . 326 (5959): 1501. Bibcode : 2009Sci ... 326.1501M . DOI : 10.1126 / science.1178817 . PMID 19933106 . 
  5. ^ Juillerat А, Pessereau С, G Дюбуа, Гуйот В, Марешаль А, Валтон Дж, Daboussi Ж, Пуаро л, Duclert А, Duchateau Р (январь 2015). «Оптимизированная настройка специфичности TALEN с использованием нестандартных RVD» . Научные отчеты . 5 : 8150. Bibcode : 2015NatSR ... 5E8150J . DOI : 10.1038 / srep08150 . PMC 4311247 . PMID 25632877 .  
  6. ↑ Christian M, Cermak T, Doyle EL, Schmidt C, Zhang F, Hummel A, Bogdanove AJ, Voytas DF (октябрь 2010 г.). «Нацеливание на двухцепочечные разрывы ДНК с помощью эффекторных нуклеаз TAL» . Генетика . 186 (2): 757–61. DOI : 10.1534 / genetics.110.120717 . PMC 2942870 . PMID 20660643 .  
  7. ↑ Li T, Huang S, Jiang WZ, Wright D, Spalding MH, Weeks DP, Yang B (январь 2011). «Нуклеазы TAL (TALN): гибридные белки, состоящие из эффекторов TAL и домена расщепления ДНК FokI» . Исследования нуклеиновых кислот . 39 (1): 359–72. DOI : 10.1093 / NAR / gkq704 . PMC 3017587 . PMID 20699274 .  
  8. ^ Махфуз М., Ли L, M Shamimuzzaman, Wibowo A, Fang X, Zhu JK (февраль 2011). «Созданная de novo гибридная нуклеаза, подобная активатору транскрипции (TALE), с новой специфичностью связывания ДНК создает двухцепочечные разрывы» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 108 (6): 2623–8. Bibcode : 2011PNAS..108.2623M . DOI : 10.1073 / pnas.1019533108 . PMC 3038751 . PMID 21262818 .  
  9. ^ a b c Чермак Т., Дойл Э.Л., Кристиан М., Ван Л., Чжан Й., Шмидт С., Баллер Дж. А., Сомия Н. В., Богданов А.Дж., Войтас Д.Ф. (июль 2011 г.). «Эффективный дизайн и сборка пользовательских TALEN и других эффекторных конструкций на основе TAL для нацеливания ДНК» . Исследования нуклеиновых кислот . 39 (12): e82. DOI : 10.1093 / NAR / gkr218 . PMC 3130291 . PMID 21493687 .  
  10. ^ a b c d e Miller JC, Tan S, Qiao G, Barlow KA, Wang J, Xia DF, Meng X, Paschon DE, Leung E, Hinkley SJ, Dulay GP, Hua KL, Ankoudinova I, Cost GJ, Urnov FD , Чжан Х.С., Холмс М.С., Чжан Л., Грегори П.Д., Ребар Э.Д. (февраль 2011 г.). «СКАЗКА об архитектуре нуклеазы для эффективного редактирования генома». Природа Биотехнологии . 29 (2): 143–8. DOI : 10.1038 / nbt.1755 . PMID 21179091 . 
  11. ^ a b c Hockemeyer D, Wang H, Kiani S, Lai CS, Gao Q, Cassady JP, Cost GJ, Zhang L, Santiago Y, Miller JC, Zeitler B, Cherone JM, Meng X, Hinkley SJ, Rebar EJ, Gregory П.Д., Урнов Ф.Д., Яениш Р. (июль 2011 г.). «Генетическая инженерия плюрипотентных клеток человека с использованием нуклеаз TALE» . Природа Биотехнологии . 29 (8): 731–4. DOI : 10.1038 / nbt.1927 . PMC 3152587 . PMID 21738127 .  
  12. ^ a b Wood AJ, Lo TW, Zeitler B, Pickle CS, Ralston EJ, Lee AH, Amora R, Miller JC, Leung E, Meng X, Zhang L, Rebar EJ, Gregory PD, Urnov FD, Meyer BJ (июль 2011 г. ). «Целевое редактирование генома для разных видов с использованием ZFN и TALEN» . Наука . 333 (6040): 307. Bibcode : 2011Sci ... 333..307W . DOI : 10.1126 / science.1207773 . PMC 3489282 . PMID 21700836 .  
  13. ^ a b Тессон Л., Усал С., Менорет С., Люн Э, Найлс Б.Дж., Реми С., Сантьяго Ю., Винсент А.И., Менг Х, Чжан Л., Грегори П.Д., Анегон I, Стоимость ГДж (август 2011 г.). «Нокаутные крысы, полученные в результате микроинъекции эмбрионов TALEN» . Природа Биотехнологии . 29 (8): 695–6. DOI : 10.1038 / nbt.1940 . PMID 21822240 . 
  14. ^ а б Хуан П., Сяо А., Чжоу М., Чжу З., Линь С., Чжан Б. (август 2011 г.). «Наследственное нацеливание гена у рыбок данио с использованием индивидуальных TALEN». Природа Биотехнологии . 29 (8): 699–700. DOI : 10.1038 / nbt.1939 . PMID 21822242 . 
  15. ^ Doyon Y, Vo TD, Мендель MC, Гринберг SG, Ван J, Xia DF, Miller JC, Урнов FD, Грегори П. Д., Холмс MC (январь 2011). «Повышение активности нуклеазы цинкового пальца с улучшенной облигатной гетеродимерной архитектурой». Природные методы . 8 (1): 74–9. DOI : 10.1038 / nmeth.1539 . PMID 21131970 . 
  16. ^ Szczepek М, Brondani В, Бюхель Дж, Серрано л, Сегал ди - джей, Cathomen Т (июль 2007 г.). «Изменение структуры интерфейса димеризации снижает токсичность нуклеаз типа« цинковые пальцы » (PDF) . Природа Биотехнологии . 25 (7): 786–93. DOI : 10.1038 / nbt1317 . PMID 17603476 .  
  17. ^ Го J, Гаджи Т, Барбас CF (июль 2010 г.). «Направленная эволюция расширенного и высокоэффективного домена расщепления FokI для нуклеаз цинкового пальца» . Журнал молекулярной биологии . 400 (1): 96–107. DOI : 10.1016 / j.jmb.2010.04.060 . PMC 2885538 . PMID 20447404 .  
  18. ^ a b Муссолино С., Морбитцер Р., Лютге Ф., Даннеманн Н., Лахайе Т., Катомен Т. (ноябрь 2011 г.). «Новый каркас нуклеазы TALE обеспечивает высокую активность редактирования генома в сочетании с низкой токсичностью» . Исследования нуклеиновых кислот . 39 (21): 9283–93. DOI : 10.1093 / NAR / gkr597 . PMC 3241638 . PMID 21813459 .  
  19. ^ а б Чжан Ф., Конг Л., Лодато С., Косури С., Черч Г.М., Арлотта П. (февраль 2011 г.). «Эффективное конструирование последовательностей-специфичных эффекторов TAL для модуляции транскрипции млекопитающих» . Природа Биотехнологии . 29 (2): 149–53. DOI : 10.1038 / nbt.1775 . PMC 3084533 . PMID 21248753 .  
  20. Перейти ↑ Hoover D (2012). «Использование DNAWorks в разработке олигонуклеотидов для синтеза генов на основе ПЦР». Синтез генов . Методы молекулярной биологии. 852 . С. 215–23. DOI : 10.1007 / 978-1-61779-564-0_16 . ISBN 978-1-61779-563-3. PMID  22328436 .
  21. ^ Morbitzer R, Elsaesser J, J Хаузнер, Лахэ Т (июль 2011 года). «Сборка пользовательских ДНК-связывающих доменов TALE-типа путем модульного клонирования» . Исследования нуклеиновых кислот . 39 (13): 5790–9. DOI : 10.1093 / NAR / gkr151 . PMC 3141260 . PMID 21421566 .  
  22. ↑ Li T, Huang S, Zhao X, Wright DA, Carpenter S, Spalding MH, Weeks DP, Yang B (август 2011). «Модульно собранные дизайнерские эффекторные нуклеазы TAL для целевого нокаута и замены генов у эукариот» . Исследования нуклеиновых кислот . 39 (14): 6315–25. DOI : 10.1093 / NAR / gkr188 . PMC 3152341 . PMID 21459844 .  
  23. ^ Гейсслер R, Шольце Н, Hahn S, Streubel J, Бонас U, Бехренс SE, Бош J (2011). Шиу С. (ред.). «Активаторы транскрипции генов человека с программируемой ДНК-специфичностью» . PLOS ONE . 6 (5): e19509. Bibcode : 2011PLoSO ... 619509G . DOI : 10.1371 / journal.pone.0019509 . PMC 3098229 . PMID 21625585 .  
  24. ^ Вебер Е, Gruetzner R, S Вернер, Энглер С, Marillonnet S (2011). Бендахман М (ред.). «Сборка дизайнерских эффекторов TAL методом клонирования Golden Gate» . PLOS ONE . 6 (5): e19722. Bibcode : 2011PLoSO ... 619722W . DOI : 10.1371 / journal.pone.0019722 . PMC 3098256 . PMID 21625552 .  
  25. ↑ Zhang Y, Zhang F, Li X, Baller JA, Qi Y, Starker CG, Bogdanove AJ, Voytas DF (январь 2013 г.). «Эффекторные нуклеазы, подобные активаторам транскрипции, обеспечивают эффективную инженерию генома растений» . Физиология растений . 161 (1): 20–7. DOI : 10.1104 / pp.112.205179 . PMC 3532252 . PMID 23124327 .  
  26. ^ Хон Вт, Коффмэн А, Clasen БМ, Demorest ZL, Лоуи А, Рэй Е, Retterath А, Стоддард Т, Juillerat А, Cedrone Ж, Матис л, Voytas DF, Чжан F (сентябрь 2014). «Повышение качества соевого масла за счет целенаправленного мутагенеза семейства гена десатуразы жирных кислот 2» . Журнал биотехнологии растений . 12 (7): 934–40. DOI : 10.1111 / pbi.12201 . PMID 24851712 . 
  27. ^ Daboussi F, Leduc S, Maréchal A, Dubois G, Guyot V, Perez-Michaut C, Amato A, Falciatore A, Juillerat A, Beurdeley M, Voytas DF, Cavarec L, Duchateau P (май 2014). «Геномная инженерия расширяет возможности диатомовой водоросли Phaeodactylum tricornutum для биотехнологии» . Nature Communications . 5 : 3831. Bibcode : 2014NatCo ... 5.3831D . DOI : 10.1038 / ncomms4831 . PMID 24871200 . 
  28. ^ а б Винерт Б., Фаннелл А. П., Нортон Л. Дж., Пирсон Р. К., Уилкинсон-Уайт Л. Е., Лестер К., Вадолас Дж., Портеус М. Х., Мэтьюз Дж. М., Куинлан К. Г., Кроссли М. (2015). «Редактирование генома с целью введения полезной природной мутации, связанной с повышенным содержанием глобина плода» . Nature Communications . 6 : 7085. Bibcode : 2015NatCo ... 6.7085W . DOI : 10.1038 / ncomms8085 . PMID 25971621 . 
  29. ^ Дэвис В, Дэвис О, Прис С, Puliyadi R, Szumska D, Бхаттачария S (2013). «Сайт-специфическая мутация локуса Zic2 путем микроинъекции мРНК TALEN в ооциты мыши CD1, C3H и C57BL / 6J» . PLOS ONE . 8 (3): e60216. Bibcode : 2013PLoSO ... 860216D . DOI : 10.1371 / journal.pone.0060216 . PMC 3610929 . PMID 23555929 .  
  30. ^ Сандер Дж. Д., Кейд Л., Хайтер С., Рейон Д., Петерсон Р. Т., Джунг Дж. К., Йе-Дж. Р. (август 2011 г.). «Направленное разрушение генов в соматических клетках рыбок данио с использованием сконструированных TALEN» . Природа Биотехнологии . 29 (8): 697–8. DOI : 10.1038 / nbt.1934 . PMC 3154023 . PMID 21822241 .  
  31. ↑ Wu H, Wang Y, Zhang Y, Yang M, Lv J, Liu J, Zhang Y (март 2015). «Нокин SP110, опосредованный TALE никазой, наделяет крупный рогатый скот повышенной устойчивостью к туберкулезу» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 112 (13): E1530-9. Bibcode : 2015PNAS..112E1530W . DOI : 10.1073 / pnas.1421587112 . PMC 4386332 . PMID 25733846 .  
  32. ^ Понсе де Леон V, Мерильят AM, Тессон L, Анегон I, Hummler E (2014). «Создание TALEN-опосредованных крыс с нокаутом GRdim путем гомологичной рекомбинации» . PLOS ONE . 9 (2): e88146. Bibcode : 2014PLoSO ... 988146P . DOI : 10.1371 / journal.pone.0088146 . PMC 3921256 . PMID 24523878 .  
  33. ^ a b c Carlson DF, Fahrenkrug SC, Hackett PB (январь 2012 г.). «Нацеливание на ДНК пальцами и таленами» . Молекулярная терапия. Нуклеиновые кислоты . 1 (3): e3. DOI : 10.1038 / mtna.2011.5 . PMC 3381595 . PMID 23344620 .  
  34. ^ Рамалинги S, Annaluru Н, Kandavelou К, Chandrasegaran S (2014). «TALEN-опосредованное создание и генетическая коррекция индуцированных заболеванием плюрипотентных стволовых клеток человека». Современная генная терапия . 14 (6): 461–72. DOI : 10.2174 / 1566523214666140918101725 . PMID 25245091 . 
  35. ^ Дупуи А, Валтон Дж, Ледюка S, Armier Дж, Галетто R, Gouble А, Lebuhotel С, Старый А, Pâques Ж, Duchateau Р, Сарасин А, Daboussi F (2013). «Целевая генная терапия клеток пигментной ксеродермы с использованием мегануклеазы и TALEN ™» . PLOS ONE . 8 (11): e78678. Bibcode : 2013PLoSO ... 878678D . DOI : 10.1371 / journal.pone.0078678 . PMC 3827243 . PMID 24236034 .  
  36. ↑ Osborn MJ, Starker CG, McElroy AN, Webber BR, Riddle MJ, Xia L, DeFeo AP, Gabriel R, Schmidt M, von Kalle C, Carlson DF, Maeder ML, Joung JK, Wagner JE, Voytas DF, Blazar BR, Толар Дж (июнь 2013 г.). «Генная коррекция буллезного эпидермолиза на основе TALEN» . Молекулярная терапия . 21 (6): 1151–9. DOI : 10.1038 / mt.2013.56 . PMC 3677309 . PMID 23546300 .  
  37. ^ Валтон Дж, Гуйот В, Марешаль А, Filhol JM, Juillerat А, Duclert А, Duchateau Р, Пуаро л (сентябрь 2015). «Разработанные CAR T-клетки с множественной лекарственной устойчивостью для аллогенной комбинированной иммунотерапии» . Молекулярная терапия . 23 (9): 1507–18. DOI : 10.1038 / mt.2015.104 . PMC 4817890 . PMID 26061646 .  
  38. ^ Пуаро L, Филип B, Шиффер-Манниуи C, Ле Клерр D, Шион-Сотинель I, Дерниам S, Потрел П, Бас C, Лемэр L, Галетто R, Лебуотель C, Эйкем J, Чунг GW, Дюклер А, Губль А , Арноулд С., Пеггс К., Пуле М., Шаренберг А.М., Смит Дж. (Сентябрь 2015 г.). "Платформа для производства мультиплексных геномных Т-клеток для" готовой "адоптивной Т-клеточной иммунотерапии" . Исследования рака . 75 (18): 3853–64. DOI : 10.1158 / 0008-5472.CAN-14-3321 . PMID 26183927 . 
  39. ^ Boissel S, Jarjour Дж, Астрахань А, Adey А, Gouble А, Duchateau Р, Shendure Дж, Стоддард Б.Л., Certo МТ, Бейкер Д, Scharenberg АМ (февраль 2014). «MegaTALs: архитектура нуклеаз с редким расщеплением для терапевтической геномной инженерии» . Исследования нуклеиновых кислот . 42 (4): 2591–601. DOI : 10.1093 / NAR / gkt1224 . PMC 3936731 . PMID 24285304 .  
  40. ^ «Плюсы и минусы ZFNS, TALENS и CRISPR / CAS» . Лаборатория Джексона . Март 2014 г.
  41. ^ Boglioli, Elsy; Ричард, Магали. «Бостонская консалтинговая группа - Отчет о точности редактирования генов» (PDF) .

Внешние ссылки [ править ]

  • E-TALEN.org Комплексный инструмент для дизайна TALEN
  • PDB Molecule of the Month Запись в ежемесячном структурном обзоре Protein Database